miR-206对胶质瘤U251细胞Cx43磷酸化表达影响的研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nanguo34
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目的:探讨微小RNA206(mi R-206)对人胶质瘤细胞U251细胞缝隙连接蛋白43(P-Cx43)磷酸化表达水平的影响。方法:将U251细胞接种到6孔培养板,同步化处理后进行转染,本次实验分为空白对照组、阴性对照组、mi R-206高表达组及mi R-206低表达组四组;阴性对照组、mi R-206高表达组及mi R-206低表达组分别转入无意义序列质粒、mi R-206质粒、mi R-206-inhibition质粒,空白对照组不进行任何相关质粒的转染。于终止转染48h后,在荧光显微镜下观察转染效率,采用Western blotting法检测不同组别U251细胞体内缝隙连接蛋白43磷酸化表达水平的改变。结果:转染终止48h后,荧光显微镜下观察不同实验组,转染效率均大于80%。mi R-206高表达组Cx43磷酸化表达水平明显升高,与空白对照组、阴性对照组比较差异均具有有统计学意义(P<0.05),mi R-206低表达组Cx43磷酸化表达水平明显降低,与空白对照组、阴性对照组相比较差异均具有统计学意义(P<0.05),空白对照组与阴性对照组相比较Cx43磷酸化表达水平不具有明显变化,差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论:通过化学转染试剂lip2000可以成功将空白质粒、miR-206高表达质粒和miR-206低表达质粒转染进入人神经胶质瘤U251细胞体内,建立实验所需模型。mi R-206可提高U251细胞内缝隙连接蛋白43磷酸化(P-Cx43)的表达水平。
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