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目的:G蛋白耦联受体（GPR30）是一种雌激素膜受体,存在于多种细胞系中,能介导细胞进行快速的信号传导。PI3K/Akt是一种重要的信号传导通路,参与多种细胞生理调节,与细胞自噬相关。线粒体自噬存在于多种细胞中,通常对细胞起保护作用。关节软骨破坏是骨性关节炎（OA）的主要特点,软骨细胞线粒体自噬与OA发病密切相关。通过体外小鼠ATDC5软骨细胞培养,检测GPR30表达,观察雌激素对GPR30表达的影响。分析对照组和实验组中LC-3、TOM20、Hsp60、Akt、mTOR、P38和JNK的表达,观察ATDC5软骨细胞的活力和增殖情况。使用GPR30阻滞剂或PI3K阻滞剂对ATDC5软骨细胞进行干预,研究17β-雌二醇对线粒体自噬的影响。研究报道OA的发病率逐年上升,严重妨碍患者生活质量,给社会造成了严重经济负担。虽然雌激素在治疗骨质疏松以及OA方面得到了证实,但作用机制尚不明确。通过体外小鼠软骨细胞的培养研究,探讨17β-雌二醇通过GPR30/PI3K/Akt途径介导,抑制ATDC5软骨细胞线粒体自噬的作用机制,为保护和改善软骨细胞功能、OA的治疗提供理论基础。方法:小鼠软骨原代细胞系ATDC5,无血清下培养24 h。采用不同浓度的17β-雌二醇、GPR30抑制剂（G15）以及PI3K抑制剂（LY294002）分组添加于ATDC5软骨细胞的培养基中培养24 h;应用Western blot和免疫荧光（IF）染色方法检测ATDC5软骨细胞中GPR30的表达;应用MTT法检测ATDC5软骨细胞的活力和增值;蛋白质制备,应用Western blot免疫印迹检测LC-3、TOM20、Hsp60、Akt、mTOR、P38和JNK等自噬标记蛋白和信号关键蛋白的活性。使用SPSS 15.0软件对数据进行分析,并评估细胞活力和增殖。数据以（x±s）表示。数据的同质性采用Student’s t检验或单向方差分析（ANOVA）验证,随后进行LSD检验。P<0.05认为差异有统计学意义。结果:GPR30在ATDC5软骨细胞中表达,且10-7mol/L的17β-雌二醇提高了ATDC5细胞GPR30的表达水平;10-8mol/L和10-7mol/L的17β-雌二醇可以减弱ATDC5细胞中的自噬,提高TOM20蛋白的活性;10-77 mol/L的17β-雌二醇可以提高体外培养的ATDC5软骨细胞的活力和增殖;10-7mol/L的17β-雌二醇可以增强Hsp60蛋白的活性,抑制LC-3蛋白的活性;10-77 mol/L的17β-雌二醇可以提高ATDC5软骨细胞中的信号关键蛋白Akt和mTOR的活性,但对P38蛋白和JNK蛋白活性没有明显影响。结论:17β-雌二醇可以促进ATDC5软骨细胞内的GPR30蛋白活性表达,激活细胞内的PI3K/Akt信号通路,抑制ATDC5软骨细胞线粒体自噬。