新城疫病毒和康莱特注射液联合抗肝癌H22的疗效及机理研究

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生物因素治疗恶性肿瘤成为目前研究热点,新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)抗肿瘤是一种已被国内外研究广泛证实的生物治疗方法,而且国外已用于临床试验。研究证明新城疫病毒抗肿瘤的作用机制之一,是可以诱导宿主细胞分泌肿瘤坏死因子、白细胞介素、干扰素、集落刺激因子等相关细胞因子。康莱特(Kanglaite,KLT)注射液是一种临床应用较好的抗肿瘤中药制剂。但是,目前关于溶瘤病毒和中药制剂联合治疗肿瘤的研究较少。本研究建立了肝癌H22小鼠肿瘤模型,分别利用NDV、KLT及NDV+KLT联合治疗荷瘤小鼠,观察用药后对照组和各治疗组小鼠的生长状况及肿瘤组织生长情况。用HE染色法,观察肿瘤组织及其他组织(心、肝、脾、肺、肾)病理变化情况。用免疫组织化学SP法,研究不同治疗组肿瘤组织中肿瘤坏死因子-α(Tumornecrosis factor,TNF-α)、干扰素-γ(Gamma-Interferon,IFN-γ)、白细胞介素-6(Interleukin6,IL-6)的阳性表达情况;通过巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验,检测各组巨噬细胞的吞噬率变化情况,进一步探讨NDV和KLT对机体免疫功能的影响。研究获得以下结果:1.成功建立了肝癌H22小鼠肿瘤模型,治疗后观察各组荷瘤小鼠的临床症状,结果表明,各个治疗组小鼠的饮食、精神状态、活动情况及毛色均好于对照组。说明三种药物治疗无不良反应,能改善患瘤机体的生长和代谢。分别测量各组肿瘤重量、肿瘤体积、体重及脾脏重量,各治疗组与对照组比较。结果表明,NDV、KLT和NDV+KLT对肿瘤的生长都有抑制作用,其中NDV+KLT治疗组抑制肿瘤生长的效果最为显著。2. HE染色结果表明,与对照组相比较,各治疗组肿瘤组织侵袭区有大量的炎性细胞浸润,炎性细胞带较宽;肿瘤组织互作区有大量的免疫细胞和大量的肿瘤细胞碎片,组织纤维结构较完整;在肿瘤组织生长区肿瘤细胞较稀疏,异型性较低。故NDV和KLT都有明显的抑制肿瘤生长、促进肿瘤细胞坏死的作用,特别是NDV+KLT联用组,体内抗肿瘤效果显著。3.免疫组化结果表明,在肿瘤组织中,与对照组相比较,TNF-α、IFN-γ和IL-6在肿瘤细胞坏死区呈强阳性表达,肿瘤细胞生长旺盛区表达很弱,治疗后期肿瘤细胞坏死区表现为弱阳性甚至阴性,说明三种药物抗肿瘤功能与这三种细胞因子作用具有相关性。巨噬细胞吞噬率统计结果表明,不同治疗时期的对照组吞噬率水平相当;各治疗组与对照组相比,吞噬率均显著提高,说明三种药物均能够刺激并提高机体免疫系统功能,活化免疫细胞,从而抑制或杀伤肿瘤细胞,起到抗肿瘤作用。综上所述,NDV和KLT能够改善患瘤机体的生长和代谢,增强免疫系统功能,从而抑制肿瘤的生长。NDV、KLT抗肿瘤功能与TNF-α、IFN-γ、IL-6细胞因子的抗肿瘤作用密切相关。其中NDV和KLT联合治疗肿瘤效果最好。
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