Activin受体Ⅱ结合蛋白基因的克隆、鉴定及ActivinA和bFGF对纹状体多巴胺能神经诱导作用的研究

来源 :吉林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dingdang19822003
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为了详细探讨Activin的信号传递机制,用Activin受体ⅡA的细胞内段作饵用酵母双杂交方法筛选得到一个新的PDZ蛋白,命名为ARIP<,2>,以ARIP<,2> cDNA为探针筛选鼠脑cDNA文库,得到ARIP<,2>的全长cDNA序列及另一个新的PDZ蛋白,因其缺乏ARIP<,2>的C末端序列,命名为ARIP<,2>-short,通过ELISA、哺乳动物双杂交及免疫沉淀鉴定二者均可通过其N末端的PDZ功能区与ActRⅡa的C末端结合;ARIP<,2>在CHO-K<,1>细胞的超表达可促进ActRⅡA的内化,而ARIP<,2>-short则减少其内化;ARIP<,2>可抑制FSH启动子的活性,并减少FSH mRNA的表达,而ARIP<,2>-short则可增强FSH的活性并增加FSH mRNA的表达.为了研究Activin对胎鼠纹状体多巴胺能神经的诱导作用,我们取E14胎鼠纹状体,用ActivinA及bFGF刺激,用RT-PCR及免疫荧光染色对多巴胺能神经相关因子进行检测,结果显示ActivinA和bFGF可协同作用诱导纹状体干细胞向多巴胺能神经进行分化.
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