枯草芽孢杆菌B68发酵培养的优化及两种剂型的初步研究

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枯草芽孢杆菌B68是从海南儋州市香蕉园中筛选获得的一株拮抗细菌。该菌株对香蕉冠腐病具有较强的防治效果,为了开发该菌株的生防制剂,本文首先对该菌株的产孢条件进行研究,然后又研究了B68菌株对香蕉上常用农药的抗药性,最后进行菌剂的初步研究,其主要研究结果如下:1.枯草芽孢杆菌B68的最佳产孢条件:芽孢形成的最适培养基组成为:葡萄糖10g,大豆饼粉10g,NaCl 5g,MnSO4·H2O 0.6g,H2O 1000ml,最佳初始pH值为7.0,最佳装瓶量为250ml三角瓶装100ml培养液,在150r/min,28℃恒温培养72h后,芽孢数量最高可达到1.60×1014CFU/ml,芽孢形成率可达到88.92%。2.B68菌株定殖香蕉果指研究表明,B68菌株能够定殖在香蕉果皮上,且在蕉果上数量是动态变化的,在第5天产生一个高峰,随后第7天B68菌落数量又降下来。3.B68菌株对常用农药的抗药性研究表明,在所测试的10种常用杀菌、杀虫剂中,云除、多菌灵不但没有抑制B68菌株总细菌及芽孢的生长,反而促进其产量的增加,与对照相比差异极显著;其它8种常用农药分别对B68菌株的总细菌及芽孢产量产生抑制影响,但显著性分析显示与对照相比差异不显著,处于同一水平。4.初步研制出枯草芽孢杆菌B68的水剂及可湿性粉剂,水剂应用于香蕉冠腐病的相对防效为68.42%,存放7个月B68芽孢存活率为92.84%;可湿性粉剂的研制通过6种载体的吸附量,货架期、成本等综合考虑,最终确定了锯木屑作为吸附载体,其吸附量为2.4L/kg,存放5个月B68存活率为64.5%。
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