【摘 要】
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CVB3是人类病毒性心肌炎的主要病原体,目前尚无特异性预防措施.该研究制备CVB3结构蛋白和非结构蛋白的DNA疫苗,拟从病毒复制周期的不同环节切断病毒的致病过程,达到预防病毒
【出 处】
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上海第二医科大学 上海交通大学医学院 上海交通大学
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CVB3是人类病毒性心肌炎的主要病原体,目前尚无特异性预防措施.该研究制备CVB3结构蛋白和非结构蛋白的DNA疫苗,拟从病毒复制周期的不同环节切断病毒的致病过程,达到预防病毒性心肌炎的目的.用HeLa细胞培养CVB3,经RT-PCR扩增CVB3结构蛋白VP1、VP2,非结构蛋白2A和3D基因片段, 重组入真核表达质粒pcDNA3中,构建成功pcDNA3/VP2、pcDNA3/VP1、pcDNA3/2A和pcDNA3/3D重组质粒,经酶切和测序证实扩增序列.经体外转染COS-7和HeLa细胞,证实重组质粒能够在真核细胞中表达.结果显示:pcDNA3/VP2、pcDNA3/VP1、pcDNA3/2A和pcDNA3/3D单独和联合免疫均可诱导小鼠产生低滴度的特异性抗体,淋巴细胞增殖反应,CTL和DTH,并对致死量的CVB3m、CVB5和CVB2攻击具有保护作用,表现为病毒攻击后第3天血中病毒滴度降低,第10天心肌病理变化比对照组明显减轻,且小鼠生存率明显提高.其中以pcDNA3/VP1和pcDNA3/VP1+pcDNA3/2A+pcDNA3/3D保护作用最明显,表明CVB3结构蛋白和非结构蛋白质粒DNA联合免疫具有协同作用.
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