枸杞多糖对P-糖蛋白影响的研究

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一、目的研究枸杞多糖对P-糖蛋白功能及表达的影响,以及枸杞多糖对P-糖蛋白底物罗丹明-123在Caco-2细胞单层模型上双向转运的影响。二、方法1细胞培养及毒性试验细胞免疫荧光法进行P-糖蛋白表达验证。用MTT法分别考察枸杞多糖、环孢素A和维拉帕米对Caco-2细胞及ECV304细胞的毒性。2枸杞多糖对P-糖蛋白功能的影响考察枸杞多糖对罗丹明-123外排的影响,从而确定枸杞多糖对P-糖蛋白功能的影响。3枸杞多糖对P-糖蛋白表达量的影响考察枸杞多糖对P-糖蛋白表达的影响,从而确定枸杞多糖对P-糖蛋白表达的影响4枸杞多糖对罗丹明-123转运的影响首先在建立Caco-2细胞单层模型考察枸杞多糖对罗丹明-123跨细胞膜转运功能的影响。三、结果1细胞培养及细胞毒性实验Caco-2细胞和ECV304细胞形态正常,生长旺盛,Caco-2细胞高表达P-糖蛋白,ECV304低表达P-糖蛋白。MTT结果显示,枸杞多糖、维拉帕米和环孢素A分别在10-150μg/mL、0.01-100μmol/L和0.01-10μmol/L范围内对Caco-2细胞为非细胞毒性剂量。2枸杞多糖对P-糖蛋白功能的影响枸杞多糖各浓度组对P-糖蛋白的功能有一定的抑制作用。3枸杞多糖对P-糖蛋白表达的影响枸杞多糖在一定浓度范围内能显著上调P-糖蛋白的表达水平,结果与功能实验结果相反。4枸杞多糖对罗丹明-123转运的影响枸杞多糖对罗丹明-123的外排转运表现出抑制作用,与功能结果同为抑制作用。四、结论1枸杞多糖对P-糖蛋白具有瞬时抑制功能和72小时的表达上调作用,因此,枸杞多糖对P-糖蛋白的作用的最终结果取决于枸杞多糖是对P-糖蛋白功能的抑制作用强还是对P-糖蛋白表达的诱导作用强。2高浓度的枸杞多糖可以通过抑制P-糖蛋白的外排转运功能而影响肠道P-糖蛋白的功能,可能增加药物的吸收,使血药浓度升高而提升疗效。
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