小儿由于神经系统、精神、心理各方面均未发育成熟，术前一般难以通过解释、说服来消除其对手术和离开双亲所造成的恐惧、不安、哭闹、挣扎。不仅影响麻醉诱导的平稳、耗费医护人力，使得环境嘈杂，其他患者精神紧张，而且给患儿术后的精神、心理带来巨大伤害，尤其是需多次手术的患儿，其影响更为严重。此外，也会给患儿家属的精神带来巨大伤痛。 多年来，由于新药不断进入临床，现用的许多药物只要有合适的剂量进入体内都可达到术前镇静的目的，尤其是氯胺酮（Ketamine KET）、多美康（Dormicum DMC）伍用是目前比较理想的选择。然而，基于小儿特点，欲使避免术前对小儿的惊扰，给药途径成为必须面对的一个难题，药物注射本身就是引起小儿哭闹的原因。经直肠、经鼻途径给药，不仅小儿不易接受，且剂量也难以准确掌握。经口则是一个比较方便易行、小儿较易于接受的途径。但因药味苦，小儿不愿饮用，易造成药液损失、药量不准确，影响药效。故必须混以较大容量的甜饮料，常因吸收慢和胃内液体潴留，进而导致反流、误吸之危险。 本研究从临床需要出发，研制出一种容量小、口感好，小儿易于接受的复方氯胺酮即KDA（KET、DMC、AT Atropine）口服溶液剂，并从三个部分探讨该剂型临床应用的可行性。包括此剂型的最佳配方、作用机制及临床效果的评价，为临床推广、应用提供理论依据及实践经验。本研究共分三个部分。第一部分：KDA口服溶液剂的研制，利用差视扫描量热法（DSC Differential scanning carlorimetry）对主药KET、DMC、AT与备选辅料进行配伍稳定性研究；利用正交实验对本制剂的口味进行处方筛选；通过检测口服液在不同时间、不同条件下保存的澄清度、pH值和各种药的浓度变化，判断口服液的稳定性。第二部分：KDA口服液对大鼠脏器机能、形态影响。通过对大鼠行为、胃肠道刺激性、重要脏器毒性作用以及对中枢神经系统N-甲基D-门冬氨酸受体1（N-methyl-D-aspartic acid Receptorl NMDAR₁）、γ-氨基丁酸A受体（－inobut…c acid A RecePtor GABA。R）的影响，探讨KDA抗恐惧作用机制。第三部分：KDA口服液的临床应用观察及其药代动力学检测，进一步证明临床应用价值和可行性。 实验材料 1．原料药和不同口服液配方1)原料药：KET、DMC人T及辅料（甜蜜素、甜叶菊糖贰、清甜素人 2）口服液配方①KDA口服液：每rnl含KET50ms刀MC sins人T 0·3mg加调味剂（清甜素、橘子香精、除苦剂等）为 1个剂量Nose d八②KD口服液：每 rnl含 KET50 mg、DMC sing加调味剂。③KET口服液：每Inl含 KET50 mg加调味剂；④DMC口服液：每血含DMCsing加调味剂配成口服制剂。大鼠按 Zul·g－’灌胃。 2．主要试剂 1)免疫组化：一抗：NMDAR；，AB1516 50fig（CHEMICON公司美国） 免疫组化染色试剂盒一套住京中山生物技术有限公司) 2)原位杂交：原位杂交试剂盒 GABA。受体 MKll 87（武汉博士德生物工程有限公司人GABA人的寡核着酸探针序列： 5’一GTCTG AAACG GGTCC GAAAC TGGTG ACGAA－－3’ 3．实验动物选健康SPragUe0awleyuD）大鼠，周龄5－6W，体重O0－200go 4．主要仪器 DSC60热分析仪(日本人高效液相色谱仪(日本厂PH S－3C酸度剂；U－MCB Olympus图象采集系统（日本）；BX60 Olympus万能显微镜照相机(日本人 METAMORPH／COOL SNAP＋X／AX70显微（荧光）图象分析系统（VIC／ROPEWOLYMPUS）US／JP；CM1800 LEICA冰冻切片机(德国h LKBl型超薄切片机（瑞典人 H600透射电镜（日本八 RMP608多导生理记录仪（日本人YSD4G药理多用生理刺激仪（中国人 实验方法 1．口服溶液剂的配制＊配伍处方筛选：KET、DMC、AT与辅料或其他药物按重量比1：1的配比混合均匀。利用差视扫描量热法对主药T等与 ·2·备选辅料进行了配伍性研究／z）口服液的口味处方筛选：在预实验的基础上利用正交实验对本制剂的处方进行口感筛选。3）稳定性实验：测试配制的口服液在不同时间、不同条件下保存溶液剂的澄清度IH值和各种药的浓度变化，判断口服液的稳定性。 2．动物实验 门动物机能观察分组：随机分6组，每组10只大鼠。 C组h习0X空白对照组，不给任何药； NS组（n＝10）：Zul·g－’0．9呢 NS灌胃； DMC＊组（n＝10）：DMC Zul·g‘，（DMC 10mg．kg’）； KET；。组（n＝10）：KET Zul·g‘，（KET100mg．kg“’）； Kl。D＊组（n＝10）：KDZul·g‘，（KET100mg·kg－‘、DMC 10mg·kg－’）； K；。D＊A。。组（n＝10）：KDAZal·g‘，（KET100mg·kg－’、DMC 10mg·kg“’、A＊．6mg·kg”‘）。 2）动物形态研究分组及脑组织固定：选健康SPragUe0awley瞩D）大鼠30只，体重 150－2009，随机分 10个时点，每个点 3只鼠。omin点：0．9％NSZul·g－‘；5、10、15、30、60、90J20、240、360min各点均用 KDA Zul·g－‘灌