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精子体外获能的顺利进行是体外受精研究以及胚胎移植的基础，对体外获能的深入研究是胚胎工程以及繁殖技术研究所必要的，具有深远意义。本实验采用上游法分离优化精子，用mTyrod’s液、BO液以及高渗液三种不同培养液5％CO2培养箱中进行获能培养，通过比较37.5℃、38.5℃、39.5℃三个温度水平，及0、10、20、50μg/ml四个肝素加入浓度来初步筛选蓝狐精子体外获能的培养体系。实验利用考马斯亮蓝染色法检测精子顶体状态考察顶体反应率，伊红-苯胺黑染色检测活精子比率以及观测法检测精子活力。获能培养时间为6小时，在培养的0、1、2、4、6h时分别检测上述指标并统计分析，通过此三方面来考察精子获能情况及精子状态，从而选出适合蓝狐精子体外获能的培养体系，讨论影响蓝狐精子体外获能的因素，每项设4个重复。本实验用mTyrod’s液、BO液以及高渗液三种不同培养液分别记为T、B、H组，结果显示，在获能培养的6h内，顶体反应率H组＞B组＞T组，T组显著低于另外两组（P＜0.05），B、H组间差异不显著；活精子百分率变化量T组＞H组＞B组，B组与T组差异显著（P＜0.05），与H组差异不显著，T、H间差异不显著，说明BO液在保护精子上优于其他两种培养液；精子活力变化量B、H组显著高于T组（P＜0.05）；说明顶体膜受到损伤就会引起精子活力的下降；三种培养液中适宜蓝狐精子体外获能效果最佳的为BO液。温度考察组考察37.5℃、38.5℃、39.5℃三个温度水平，分别记为B1、B2、B3组，结果显示在BO液获能培养的6小时内，B2组精子顶体反应率在72.49±5.26％，显著高于B1及B3组（P＜0.05）；而伊红染色检测精子活率显示同样是38.5℃条件下培养活精子百分率75.38±1.17％显著高于其他两组（P＜0.05）；活精子百分率变化量B1＞B3＞B2；精子活力检测显示精子活力变化量B2＞B1＞B3，说明发生顶体反应后精子活力明显下降，不利于精子保存。综合三项指标蓝狐精子在体外38.5℃下无菌培养各项指标均优于37.5℃、39.5℃。肝素浓度考察0、10、20、50μg/ml四个肝素加入浓度分别记为T1、T2、T3、T4组，结果显示，在获能培养的6小时内，顶体反应率T3组（68.57±8.03％）显著高于其他三组，具体顺序为T3＞T2＞T1＞T4；活精子百分率同样是T3＞T2＞T1＞T4，组间差异不显著；各组精子活力变化量T2、T3＞T1＞T4，组间差异不显著；结合三方面检测结果20μg/ml为适宜蓝狐精子体外获能的肝素浓度。通过比较三项指标得出以下结论：B培养液优于T、H培养液，最佳获能培养时间t=6小时；高渗液可以提高精子顶体反应率，但较高的渗透压不利于精子保存，不建议使用；蓝狐精子体外获能温度为38.5℃为宜，在精子顶体反应率、活率及活力均优于37.5℃、39.5℃；发生顶体反应会引起精子活力的下降；肝素可以诱导蓝狐精子获能，与对照组差异显著，蓝狐添加浓度以20μg/ml为宜，高剂量（50μg/ml）在短时间内效果明显，但不宜长时期培养。