以金属离子功能化的还原性氧化石墨烯-四乙烯五胺（rGO-TEPA）作为信号放大策略发展的免疫分析方法,是将金属离子的电活性与rGO-TEPA的物化特性相结合用于心血管标志物检测的分析方法。由于rGO-TEPA兼具良好的导电性和富含大量氨基,可将金属离子直接吸附于其表面,用于构建负载有大量金属离子的信号探针,发展高灵敏的免疫分析方法。这种金属离子功能化的rGO-TEPA信号探针较常规的金属离子功能化的纳米材料探针而言,其合成过程更为简便,避免了材料氨基化处理,同时金属离子可通过差示脉冲伏安法直接检测,这样避免了溶出伏安法的酸溶解和金属欲浓集过程。因此,大大简化了分析过程。本论文围绕金属离子功能化的rGO-TEPA探针的制备,免疫传感器的构建,和心血管标志物的检测,开展了以下两方面的内容:一.应用Pb²⁺修饰的rGO-TEPA作为纳米信标对分泌神经素的电化学免疫检测研究由于rGO-TEPA富含大量氨基,因此其可作为Pb²⁺吸附理想模板。通过交联剂戊二醛将分泌神经素二抗固定于rGO-TEPA-Pb²⁺表面,所得纳米复合物(Ab2-rGO-TEPA-Pb²⁺)作为信号标记用于信号放大。金纳米粒子功能化的石墨烯片（Au@GS）作为电极修饰材料用于分泌神经素抗体的固定。在最优实验条件下,免疫分析展现出了高的灵敏度,较好的稳定性,重现性以及宽的线性范围,线性范围为0.001到100 ng mL-1,检测限低至0.33 pg mL-1。此外,免疫传感器能够用于临床血液样品中分泌神经素的检测。二.应用金属修饰rGO-TEPA纳米信标实现对高敏C反应蛋白和可溶性CD40配体的同时多组分检测利用rGO-TEPA上的氨基直接吸附Pb²⁺和Cu²⁺。采用戊二醛将高敏C反应蛋白和可溶性CD40配体分别交联在rGO-TEPA-Pb²⁺和rGO-TEPA-Cu²⁺表面用于信号放大。在同一界面通过差分脉冲伏安法（DPV）可实现电信号的直接检测,每一生物识别反应产生一个显著的伏安峰。峰的大小和位置反应了相应抗原的水平。为了进一步提高免疫传感器的分析性能,通过“绿色”合成途径制备了牛血清白蛋白包裹的金纳米粒子纳米球（Au@BSA）,作为电极修饰材料,其不仅为抗体的固定提供了生物相容性微环境,同时放大了检测信号。在最佳条件下,高敏C反应蛋白和可溶性CD40配体在0.05到100 ng mL-1的范围内呈现出良好的线性关系,其检测下限分别为16.7 pg mL-1和13.1 pg mL-1.临床血浆样品经所构建的免疫传感器和酶联免疫吸附试验分析,结果显示两种检测方法结果具有一致性。