论文部分内容阅读
泽泻始载于《神农本草经》,列为上品。《中华人民共和国药典》2010年版一部记载,泽泻为泽泻科植物泽泻Alisma orientale (Sam.) Juzep.的干燥块茎。具有利水渗湿、泻热、化浊降脂的功效。泽泻为一类大宗常用的中药材,在临床配伍和中成药生产中使用广泛。现代药理研究表明,泽泻有利尿、降血脂、降血糖及抗动脉粥样硬化等作用。为了保证泽泻药材品质优良,本研究对不同主产地药材的亲缘关系和遗传多样性进行研究,为良种繁育奠定基础;并开展泽泻优良品种选育工作,已筛选出泽泻F1代优良品种,并制定了泽泻种子和种苗的标准。研究结果如下:1.不同产地泽泻亲缘关系和遗传多样性研究(1)本草考证结果表明:古代本草共记载了6种泽泻植物,其中有4种是泽泻属植物,1种是非泽泻属植物,1种因为记载太粗略无法判断。4种是泽泻属植物中有两种和《中国药典》2010年版一部收载的泽泻Alisma orientale (Sam.) Juzep.相一致,另外2种分别为小泽泻Alisma nanum D. F. Cui和窄叶泽泻Alisma canaliculatum A. Braun et Bouche.。说明泽泻在古代存在品种混乱、一药多源的现象。泽泻在古代就以四川、福建为主要产区,并认为质量较好。(2)生育特性和植物形态研究结果表明:四川种源的泽泻最早萌发,开花和结果的生长发育期明显比其他产地短。不同产地泽泻在植物形态上没有明显区别,要从植物形态区别不同产地泽泻比较困难。四川种源的泽泻大部分叶片会呈三束整齐的排列,而其他产区的泽泻该特征不明显或比例较少。(3)泽泻药材HPLC指纹图谱研究结果表明:4个产地泽泻共有指纹图谱标定11个共有峰。经过环氧泽泻烯、24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B对照品峰指认,分别为2号峰、5号峰和8号峰。同一个产地的种源样品相似度值较接近,不同产地种源样品的相似度平均值存在较小差异,但均无统计学意义。可见不同产地泽泻HPLC指纹图谱非常相近,化学成分组成整体相似。不同产地泽泻相似度平均值间的差别,主要是各组分含量的大小差异带来的。且良种选育对药材化学成分组成的影响不大。(4)ISSR分子标记研究结果表明:用筛选出的35条ISSR引物对23个泽泻样品进行扩增。总的多态位点百分率为70.5%,Nei’s基因多样性(He)为0.4196,Shannon’s信息指数为0.6081,表明不同产地泽泻遗传多样性较好。在遗传相似度为0.5349处作一条线,可将23个样品分成2大类:第一类有21个样品,涉及所有泽泻主产地。第二类有2个样品,分别为福建省建阳市水吉镇和福建省福州市永泰县同安镇收集的样品,说明这两个样品遗传距离较近。第一大类又分别聚为两大类群,第一大类涉及广西、四川、福建、江西等产区,第二大类涉及四川和福建产区。可见泽泻没有产生明显的产地遗传分化,也没有明显的地域性差异。种质资源的相互流通,可能是出现不同产地泽泻区域遗传差异不明显的原因。泽泻的遗传多样性水平高,而遗传分化水平低,利于培育泽泻的优良品种。2.优良品种选育研究(1)产量测定结果显示:植株生长状态和产量明显相关。“三棱子”所占比例和产量具有极显著的相关性(P<0.01)。地上部分呈现“三棱子”状态的植株,往往块茎相对较大。故“三棱子”对于优质植株筛选和优良品种选育有很大的价值。四川种源的样品,产量较高;福建、广西和江西种源的样品,生长状态不一致,产量均不及四川种源的样品,且差异悬殊很大。良种选育后,F1代优良品种生长状态都比前1年好。经方差分析,F1代泽泻样品产量和前1年有显著差异(P<0.05)。其中增加最多的为前1年的1.5倍,四川种源的样品为前1年的1.1-1.2倍。可见,良种繁育对产量提高效果明显。(2)含量测定结果表明:泽泻样品均含有环氧泽泻烯、24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B,但是不同样品各个成分含量不一。且优良品种选育,对化学成分组成影响不大,各成分含量比例也未见明显规律性。即使是来自同一个省份的种源,在同一栽培地点和栽培方法下,其单一化学成分含量和化学成分含量比例也会有所差异。(3)有效成分总含量测定结果表明:第1年栽培后,来自四川种源的样品单位面积有效成分总含量最高,明显高于其他种源的样品。可能与四川种源的泽泻具有本身的品种优势以及生态适应性更好有关。良种选育后,F1代样品每亩的有效成分总量均显著上升(P<0.05)。增长最多的为原来的2.1倍,最低增长为原来的1.2倍。可见,良种选育对泽泻质量提高效果明显。(4)优质植株筛选结果显示:“三棱子组”的单株平均块茎大小和产量和“非三棱子组”有非常显著(P<0.01)的差异,“三棱子”具有更好的品种优势。优质植株筛选前后有效成分总含量有非常显著差异(P<0.01)。优质株系有效成分总含量最多可以达到筛选前的2.1倍,最少可以达到筛选前的1.3倍。可见,优质株系的筛选对于泽泻质量的提高效果很明显。F1代优质植株质量比上年又有明显提高,可见优质植株筛选还有空间。3.种子和种苗质量标准的建立(1)种子质量评价指标测定结果表明:收集的种子净度、千粒重、发芽率和生活力差异较大,F1代种子差异小。F1代种子千粒重、发芽率和生活力明显高于市场上收集的种子(P<0.01),F1代晚熟种千粒重、发芽率和生活力均优于F1代早熟种(P<0.01)。线性回归分析结果表明,千粒重与发芽率和生活力呈极显著正相关线性关系(r>r0.。,)。千粒重评价泽泻种子质量的重要指标。最终,初步拟定泽泻种子质量标准为:水分≤13%、净度≥90%、千粒重≥0.3700g、发芽率≥80.0%和生活力≥86.0%。(2)种苗质量评价指标测定结果表明:按照栽培技术的要求进行育苗。种苗健康率、种苗高度、叶片数目和种苗根的长度均比较稳定。泽泻单株有效成分总含量与种苗健康率和种苗高度呈极显著正相关线性关系(r>r0.。1),种苗健康率和种苗高度对于评价泽泻种苗质量具有重要意义。最终,初步拟定泽泻种苗质量标准为:种苗健康率≥93%、种苗高度≥16cm、种苗叶片数目为6-8片。