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近年来,细菌耐药性问题日益严重,这与抗生素在临床中的广泛应用密切相关。肠球菌作为人类和动物临床的重要病原菌,一直以来都被认为是多种耐药基因的贮库,现在已成为院内感染的主要病原菌之一。因此,对肠球菌耐药基因传播机制的研究,具有重要的公共卫生学意义。本研究以分离鉴定的69株猪源肠球菌为基础,进行林可霉素-截短侧耳素-链阳菌素A外排泵基因lsa(E)的检测、细菌接合试验、脉冲场凝胶电泳(Pulsed Field Gel Electrophoresis,PFGE)、Southern杂交、全基因组测序等,来探讨lsa(E)耐药基因的传播机制。结果显示,lsa(E)基因在猪源肠球菌中的检出率为53.6%(37/69)。选取部分菌株进行接合试验,结果显示,lsa(E)耐药基因可以发生接合转移,接合效率为:0.18-3.3×10-6。定位试验显示,lsa(E)基因可位于质粒上,也可位于染色体上。全基因组测序分析获得2种不同的lsa(E)基因遗传环境:(1)lsa(E)基因位于一个50kb左右的接合型质粒上,其与erm(B)、aac、aacA-aphD、aadE、apt、spw、lnu(B)、rec等基因形成一个14.8kb的多药耐药基因簇;(2)lsa(E)基因位于染色体上,与erm(B)、aac、aacA-aphD、aadE、sat4、aphA3、apt、spw、lnu(B)等基因形成一个19.1kb的多药耐药基因簇,其侧翼区还存在部分的IS插入序列和转座酶基因。这些数据提示,lsa(E)基因及其耐药基因簇可通过接合或转座的方式发生水平转移。lsa(E)多药耐药基因簇可以编码对大环内酯类、氨基糖苷类、林可胺类、截短侧耳素类以及链阳菌素类的耐药,从而加速了多药耐药肠球菌在临床上的出现。综上所述,本研究发现lsa(E)基因可位于质粒上,也可位于染色体上。获得了2种新的lsa(E)基因遗传环境,转座或重组加速了lsa(E)多药耐药基因簇的形成,接合可导致lsa(E)基因及其多药耐药基因簇的水平转移,为lsa(E)基因及其耐药基因簇在兽医临床上的快速传播提供了理论解释。