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苏云金芽胞杆菌是一种在土壤中广泛分布的革兰阳性菌,其在芽胞形成期产生的伴胞晶体对昆虫,线虫,螨虫等有毒杀作用。秀丽小杆线虫是一种小型的自由生活在土壤中的线虫,Cry6A和Cry5B是两种典型的杀线虫晶体蛋白,目前有关晶体蛋白对秀丽小杆线虫作用机制的研究主要集中在Cry5B上,Cry6A对秀丽小杆线虫作用机制的研究对于拓宽杀线虫谱和开发新的杀线虫资源有重要意义。
本研究通过对比Cry6A和Cry5B在氨基酸序列和三维结构上的差异,推测它们对秀丽小杆线虫有不同的作用方式。通过Cry6A对秀丽小杆线虫和北方根结线虫的活性测定,发现其对秀丽小杆线虫和北方根结线虫有好的毒杀活性,能够抑制秀丽小杆线虫线虫的生长、产卵,引起线虫运动异常,同样能够抑制北方根结线虫虫卵的孵化。
本研究发现Cry6A能够引起线虫摄食减少,引起线虫的逃逸,说明毒素在侵入线虫时,能够引发线虫的行为防御反应。
发现对Cry5B有抗性的Bre突变体对Cry6A敏感,Cry6A对Bre突变体有毒杀活性,抑制Bre突变体的生长和产卵。在用Cry6A和Cry5B共同作用秀丽小杆线虫时,发现两种毒素蛋白存在协同作用。以上实验表明Cry6A和Cry5B在作用秀丽小杆线虫时存在不同的作用方式,验证了之前推测的正确。
通过蛋白质组学技术初步鉴定到了4个蛋白受体,发现Cry6A能够抑制线虫蛋白的表达,同时能够诱导线虫表达特异性蛋白。初步探索了Cry6A对秀丽小杆线虫的作用机制,但其具体作用机制有待进行深入研究。
本研究发现坚强芽胞杆菌YBf-10能够防治北方根结线虫,其能减少番茄根部根结数量、减少番茄根上虫卵数、降低土壤中虫口密度、促进植株生长,在杀线虫资源的筛选与开发上具有重要意义。