石斛属(Dendrobium)是兰科第二大属,具有极高的欣赏和药用价值,在花卉市场和药材市场扮演着重要角色。但是石斛对生存环境要求苛刻,繁殖能力弱,难以满足快速增长的市场需求,长期以来对野生石斛的过度开采导致野生石斛资源的严重破坏,大量野生石斛品种已濒临灭绝,因此对石斛的研究和保护刻不容缓,亟需建立一套有效利用和保护兼顾的技术手段来实现石斛的长久可持续开发利用。因此石斛兰的快速繁殖和种质保存技术成为满足市场需求和保护濒危物种的关键办法。本研究以金钗石斛和铁皮石斛为实验对象,建立了一套以石斛成株组织诱导原球茎进行快速繁殖的技术,同时建立了一套有效的超低温保存技术进行石斛的种质资源保存,将石斛的快速繁殖和种质资源保存相结合,建立了一套石斛可持续开发利用和保护的系统方法。主要结果1、建立高效的石斛兰组织诱导原球茎技术我们通过对石斛的根尖,茎尖,茎段的诱导培养实验,确定了石斛茎尖作为原球茎诱导材料可以获得较好的诱导效率,通过以MS、B5、N6为基础培养基,萘乙酸、6-BA、2,4-D为激素的正交实验,确定了以石斛茎尖作为诱导石斛原球茎材料的最佳诱导培养基为1/2MS+3.8g/L琼脂糖+萘乙酸0.5～2mg/L+6-BA0.3～1mg/L。在此基础上建立了一套完整的石斛组织诱导原球茎的技术方法。2、建立了一套适合石斛原球茎的超低温保存技术以石斛原球茎为实验对象,通过多步脱水过程降低石斛原球茎中自由水含量,并在保护下进行超低温冻存,进行种质资源保存。本研究主要采用了包埋法,玻璃化法和包埋玻璃化法对石斛原球茎进行冻存保护,实验表明包埋玻璃化法具有最好的冷冻保护能力,适用于石斛原球茎的超低温冻存。