三穗麻鸭PMEL-17、DRD4和5-HT1A基因表达及生物信息学研究

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为研究三穗鸭100 kDa型跨膜糖蛋白受体基因(PMEL-17)、多巴胺受体基因(DRD4)和5-羟色胺1A型受体基因(5-HT1A)在三穗鸭各个组织中的表达情况,进一步探讨三穗鸭啄羽行为的发生机制。本研究应用分子遗传学手段并应用SPSS和Excel等生物信息学分析软件对三穗鸭PMEL-17、DRD4和5-HT1A基因在三穗鸭心、肝、脾、肺、肾、肠、脑、胸、腿、眼、肌胃和腺胃12个组织的表达情况进行了生物学分析。选取60只三穗鸭进行啄羽行为和正常行为观察,屠宰后选取3只(啄羽行为1只,正常行为2只)三穗鸭,并采集其各个组织,利用Trizol法对以上组织进行RNA提取,构建三穗鸭的cDNA文库,利用荧光定量PCR对上述三个基因在相关组织中的表达量进行检测。最后,应用RT-PCR并结合载体构建的方法对三穗鸭PMEL-17基因的完整编码区(CDS)进行克隆,对其结果进行生物信息学分析。得出以下结果:1.5-HT1A受体基因在啄羽行为组脑组织中表达量最高且表达差异极显著显著(P<0.01),其次是在肾组织中,其表达结果差异显著(P<0.05)。剩余的10个组织,该基因的表达量相近并且5-HT1A基因相较于正常行为组表达差异均不显著(P>0.05)2.DRD4受体基因在啄羽行为组脑组织中表达量最高且表达差异极显著显著(P<0.01),且该基因在啄羽行为组脑组织中的表达量远高于正常行为组。在剩余的11个组织,该基因的表达量在正常行为组与异常行为组中的表达量相近,并且DRD4基因相较于正常行为组表达差异均不显著(P>0.05)3.PMEL-17受体基因在啄羽行为组脑组织中表达量最高且表达差异极显著显著(P<0.01),且该基因在啄羽行为组脑组织中的表达量远高于正常行为组。在剩余的11个组织,该基因的表达量在正常行为组与异常行为组中的表达量相近,并且PMEL-17基因相较于正常行为组表达差异均不显著(P>0.05)4.三穗鸭PMEL-17基因的CDS区发生了G+573A和G+1293A两个同义突变位点,其二级结构发生了轻微的改变,但是其翻译的蛋白质的结构并没发生改变。综上所述,5-HT1A、DRD4和PMEL-17受体基因对三穗鸭啄羽等异常行为可能有显著调控作用,且PMEL-17受体基因的CDS区结构的改变可能未对三穗鸭的异常行为产生影响。
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