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干旱、盐碱、高温和低温等非生物胁迫严重影响农作物产量,抗逆相关基因的克隆、表达调控及功能分析等研究,为作物抗逆育种提供了潜在的有效途径。转录因子是一类重要的调节基因,在时空上调控下游抗逆基因的转录表达。DREB转录因子属于AP2/EREBP转录因子家族,具有典型氨基酸保守结构域,可特异地与DRE顺式作用元件结合,激活下游多个抗逆基因的表达,提高植物的抗逆性。本研究以几个小麦DREB类转录因子基因为对象,对其互作蛋白进行筛选,并通过对其转基因拟南芥和小麦的转化体筛选,分析其在不同逆境下的功能,以促进小麦抗逆性的分子改良。取得的主要研究结果如下:1. DREBT互作蛋白的筛选研究,通过构建pGBKT7-DREBT诱饵载体,利用酵母双杂交技术从小麦cDNA文库中筛选DREBT的互作蛋白,阳性克隆的测序和序列比对分析,得到4类候选蛋白。同源性分析发现其主要参与信号转导和免疫过程,表明DREBT参与了植物逆境下的信号转导,对于调控胁迫相关基因表达具有重要作用。2.小麦DREB类基因的在不同逆境条件下的表达模式研究,采用Real-Time PCR方法,以各种胁迫处理的小麦地方品种小白麦的cDNA为模板,研究了DREBT、DREBF、DREB5、DREB8、DREB10和W42基因的表达特性。结果表明,小麦DREB类不同基因受不同胁迫诱导表达存在时空差异,在高盐、干旱、高温、低温和茉莉酸甲酯胁迫处理下,DREB类基因可被强烈诱导表达。3.转DREB类基因拟南芥的筛选及其抗逆性分析,通过筛选DREBT、DREBF、DREB5、DREB8和W42基因的拟南芥转化体,并对T4代转化体的抗旱、耐盐和耐高温鉴定结果表明,在高温和干旱胁迫下,DREB类基因的过表达可提高拟南芥的抗性,但在高盐环境下,DREB类基因的耐盐性不是很明显。渗透势测定结果显示:转DREB类基因拟南芥幼苗的渗透势大部分都低于野生型品种,说明DREB类基因可以抵抗外界胁迫带来的危害。4.转DREBT/DREBF基因小麦的鉴定与抗逆性分析,采用标记基因Bar分子检测发现,转基因小麦后代外源基因有部分丢失。转DREBT/DREBF基因小麦的脯氨酸和相对叶绿素含量高于受体品种。温室鉴定结果表明:DREBT/DREBF基因的过表达可改良小麦整体农艺性状,提高抗旱性。综上所述,小麦DREB类转录因子基因都具有较好的抗逆性,特别是DREBT和DREBF基因具有明显的抗旱性,W42基因在高温,高盐和干旱条件下都具有较好的功能,这些为小麦抗逆基因工程研究奠定了良好的基础。