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目的本文通过丙戊酸钠(valproic acid,VPA)干预肺纤维化大鼠,观察粒状头样2(grainyhead-like2,GRHL2)在正常大鼠及肺纤维化大鼠肺组织的表达情况,并通过观察E-钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)及β-连环蛋白(β-catenin)表达情况,探讨VPA减轻肺纤维化的作用机制及Wnt-β-catenin信号通路在该过程中的作用。方法选取雌性SD大鼠45只,随机分为三组:生理盐水组(NS组)、肺纤维化模型组(BLM组)、丙戊酸钠干预组(VPA组),每组均为15只。BLM组、VPA组气管内注射博莱霉素溶液(5mg/kg)建立大鼠肺纤维化模型。NS组以同样方法气管内注射等量生理盐水作对照。VPA组大鼠给予腹腔内注射丙戊酸钠(200mg/kg/d)作干预处理,BLM组大鼠腹腔内注射等量生理盐水作对照。各组随机于造模后第7、14和28天分3批处死,行苏木素-伊红(HE)染色、Masson染色观察大鼠肺组织炎症程度,Masson染色观察各组肺组织胶原纤维差异,Ashcroft评分、肺组织羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)检测观察各组三个时间点肺纤维化的动态变化。免疫组化检测各组GRHL2表达情况,免疫组化检测E-cadherin、vimentin观察各组上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)程度;免疫组化检测β-catenin判断各组Wnt-β-catenin信号通路的差异。结果(1)HE染色:NS组大鼠肺组织结构大致正常;BLM组大鼠第7天、14、28天炎性细胞、纤维增生明显增加,正常肺泡结构被破坏,肺泡间隔明显增宽。VPA组大鼠第7、14、28天纤维增生较BLM组减少,伴少量炎性渗出,肺泡结构尚存。(2)Masson染色镜下表现:NS组大鼠未见明显蓝色胶原沉积;BLM组大鼠肺泡间隔明显增厚,肺泡形态基本消失,被大量蓝色胶原占据,且第28天与第7天相比蓝色胶原沉积明显加重(P<0.05);VPA组大鼠蓝色胶原沉积较BLM组明显减少,肺泡结构尚存(P<0.05)。(3)HYP含量及Ashcroft评分:与NS组比较,BLM组第7、14、28天肺组织HYP含量及Ashcroft评分明显增加(P<0.05);VPA组HYP含量及Ashcroft评分则介于NS组与BLM组之间,较BLM组均明显降低(P<0.05)。BLM组内第7天、14天、28天比较差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)GRHL2、E-cadherin免疫组化:GRHL2、E-cadherin在NS组肺组织均可见明显阳性区域;BLM组在第7、14、28天随着纤维化程度加重阳性区域明显减少,与NS组比较差异具有统计学意义(P<0.05),BLM组内第7、14、28天之间存在明显差异(P<0.05);VPA组阳性表达趋势与BLM组相似,但纤维化程度较BLM组轻,因此阳性区域明显高于BLM组(P<0.05)。(5)vimentin、β-catenin免疫组化:vimentin、β-catenin在NS组均无明显阳性表达;BLM组第7、14、28天随着纤维化程度加重,肺泡结构被破坏,阳性区域明显增加,与NS组比较差异具有统计学意义(P<0.05),BLM组内第7、14、28天之间存在明显差异(P<0.05);VPA组表达趋势同BLM组,但阳性区域明显少于BLM组(P<0.05)。结论(1)VPA干预肺纤维化大鼠,能够明显减轻大鼠肺泡炎,降低肺组织纤维化程度。(2)VPA可能通过调节GRHL2的表达,从而抑制EMT过程,减轻肺组织纤维化。(3)在VPA减轻大鼠肺纤维化过程中,Wnt-β-catenin信号通路有可能起到重要作用。