胆道梗阻—再通术后肾水通道蛋白1表达变化的实验研究

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前言 梗阻性黄疸(Obstructive Jaundice,OJ)是肝胆外科常见的病症之一。OJ围手术期可发生多种并发症如脓毒血症、胃肠道出血、伤口愈合延迟及术后急性肾功能衰竭(Acute renal failure,ARF)等。肾脏是梗阻性黄疸最敏感的靶器官,临床上OJ病人均存在不同程度的肾功能损害,手术打击常致肾功能损害进一步恶化乃至肾衰,是OJ病人术后死亡的重要原因。OJ对肾功能影响的作用机制至今尚不明确。水通道蛋白是一族广泛存在于人类各种组织细胞中,可使水通过浆膜的膜蛋白。生理情况下,水通过细胞膜包括磷脂双层的简单扩散和通过特殊跨膜转运蛋白的快速转运两个过程。水通道蛋白在介导自由水被动跨生物膜转运,维持细胞内外环境的稳定平衡中具有特殊作用,肾脏AQP1对肾水的调控起着极为重要的作用。AQP1能够调节水的重吸收,有研究发现在人和大鼠肾近曲小管及髓袢降支细段均有大量AQP1存在。目前在梗阻性黄疸的研究中对水通道蛋白的研究还很少,了解水通道蛋白的变化能为探索梗阻性黄疸手术前后肾功能的改变提供新观点、新思路。 实验材料 1.实验动物Wistar大鼠、雄性、4周龄、250—300克,由中国医科大学附属二院动物实验室提供。 2.主要试剂PCR引物由上海细胞生物所合成、φX174—HincⅡdigest DNA Marker、PCR—RT、Taq—DNA聚合酶、Trizol、一抗购自武汉博士德公司、二抗购自Sigma公司、电泳用聚丙烯酰胺及Tris,甘氨酸等购自上海生工公司。 3.实验仪器 德国产Heraus—Biofuge—PrimoR型超速低温离心机、
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