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白芍为常用中草药,按产区分为三大类:产浙江的称“杭芍”,产安徽的称“毫芍”,产四川的称“川芍”。白芍中含有多种有效活性成分,其中最重要的成分为白芍总苷类。
白芍总苷的应用十分广泛,具有多途径抑制自身免疫反应,以及抗炎、止痛、保肝的作用。对于白芍总苷的测定,现在多是测定其一种或几种成分,对于白芍总苷测定的研究极少,据此,本论文进行了下列研究:
1.根据白芍总苷的性质,对白芍总苷的提取工艺进行了研究。在提取工艺中对提取各因素进行了单因素和正交试验的研究,确定了白芍总苷提取的最佳条件。
2.利用AB-8大孔吸附树脂对提取的白芍总苷进行纯化。实验表明,采用壳聚糖溶液澄清提取液,上柱吸附后,以1滴/s的速度,30%乙醇洗脱,收集浓缩液真空干燥后可得白芍总苷粉末。
3.根据白芍总苷各成分都含有苯甲酸酯键这一特点,建立了碱水解紫外分光光度法和荧光光谱法测定白芍总苷的新方法。紫外分光光度法在2.0~10.0μg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系,回归方程为A=0.0187+0.0798c,相关系数r=0.9984。利用该方法测定白芍药材中白芍总苷含量,平均回收率为99.1%,相对标准偏差为1.13%。荧光法测定1.0~10.0μg/mL范围内荧光强度和苯甲酸的浓度呈良好的线性关系,△F=2.6175+12.2582c,相关系数r=0.9998。利用该方法测定白芍药材中白芍总苷含量平均回收率为99.45%,相对标准偏差为2.13%。并用色谱法与上述两种方法对比,结果表明均无明显差异,两种方法具有简便、快速、节省试剂、灵敏的特点。
4.对白芍根中的挥发油成分进行分析。采用GC-MS进行定性定量测定,检索NIST谱图库,鉴定出50种化合物,其中主要成分酸类占总挥发油总量的46.37%,其次的酯类化合物占38.72%,醇类化合物占9.18%,酮类化合物占1.93%,烷烃类化合物占1.10%。
5.对有白芍参与配伍的传统名方四逆散进行了紫外谱线组图谱研究。将四逆散中的四味药白芍、枳实、柴胡、甘草及其相互配伍使用三种不同极性溶剂进行萃取,运用紫外谱线组图谱进行了测试比较。发现全方配伍有利于芳环物质的溶出,并推测芳环化合物及全方配伍中芳环物质中引入的基团和有可能生成的新的芳环物质对四逆散的药效可能具有较强的相关性。