近年来,随着人工配合饲料的技术突破与推广,大口黑鲈（Micropterus salmoides）的养殖区域和养殖规模迅速扩张,养殖产量迅速攀升,在2020年我国大口黑鲈的养殖总产量就已超过60万吨。虽然全程饲料养殖技术日益成熟,但在养殖中、后期,摄食配合饲料极易导致大口黑鲈肝脏病变。饲料淀粉水平是影响大口黑鲈肝脏健康最主要的因素,当淀粉超过10%左右就会诱导肝损伤,但其潜在机制仍然未知。大口黑鲈代谢性肝损伤推动了其饲料淀粉水平下行,低淀粉饲料中过高的蛋白水平除导致成本上升外,亦可能加剧大口黑鲈肝脏的代谢负担。因此,本论文旨在研究饲料蛋白和淀粉水平对大口黑鲈的生长、饲料利用、血浆（清）生化和肝脏健康的影响,并借助转录组分析探究了高淀粉饲料诱导大口黑鲈肝损伤的潜在机制,主要研究内容如下:1.投喂低蛋白高淀粉饲料对大口黑鲈生长、饲料利用、血浆生化及肝细胞炎症和凋亡的影响本实验配制了两组等脂等能的饲料,分别为高蛋白低淀粉组（P49S9,含48.8%蛋白和9.06%淀粉）和低蛋白高淀粉饲料（P42S18,含42.4%蛋白和18.2%淀粉）。将初始体重为4.65 g的大口黑鲈幼鱼随机分到6个循环水玻璃缸（体积为250 L）中,每个处理组设置3个重复,每个重复分配25尾鱼。养殖试验的周期为8周,投喂模式为表观饱食投喂。结果表明,尽管P42S18组通过增加摄食率以尽可能满足其蛋白需求,但P42S18组的饲料效率和生长性能仍低于P49S9组。过碘酸希夫反应（PAS）染色显示,投喂低蛋白高淀粉饲料会促进大口黑鲈肝脏糖原累积,其原因可能与糖原分解酶（糖原脱支酶,gde）的表达下调有关。摄食低蛋白高淀粉饲料的大口黑鲈肝脏脂肪水平较低,这可能是与脂蛋白酯酶（反映甘油三酯合成,上调）和二酰基甘油酰基转移酶（反映甘油三酯分解,下调）调节的肝脏甘油脂代谢改变有关。虽然空腹血浆葡萄糖水平相当,但P42S18组葡萄糖耐受能力比P49S9组要差。苏木精-伊红染色法（H＆E）和TdT介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）染色结果表明,投喂低蛋白高淀粉饲料会破坏大口黑鲈肝细胞结构完整性,并诱导炎症反应和细胞凋亡。KEGG富集分析表明,上调的差异表达基因主要富集在AGE（高级糖化终末产物）/RAGE（AGE受体）、Toll-like receptor和Apoptosis信号通路中。转录组分析显示,投喂低蛋白高淀粉饲料可能通过促进AGEs在大口黑鲈肝脏中累积,与RAGE结合并激活PI3K/Akt信号途径。Akt的激活诱导NF-κB转位到细胞核,促进肿瘤坏死因子-α（tnf-α）和白细胞介素-8（il-8）的释放,这些炎症因子可通过Toll-like receptor信号传导途径诱导T细胞刺激和自然杀伤细胞趋化作用。除了介导炎症和免疫反应,TNF-α信号转导可通过TNF受体（TNF-R1）途径参与介导细胞凋亡,上调半胱天冬氨酸特异性蛋白酶8（caspase 8）和细胞色素c（cytc）的表达。综上所述,本实验结果表明,投喂低蛋白高淀粉饲料可通过PI3K/Akt/NF-κB信号通路诱导大口黑鲈肝细胞炎症反应和凋亡发生。2.饲料淀粉水平对大口黑鲈生长性能、饲料利用、血清生化和肝脏健康的影响本试验配制了三组不同淀粉水平的饲料,分别为低淀粉组（LC,8.13%淀粉）、中淀粉组（MC,14.1%淀粉）和高淀粉组（HC,20.1%淀粉）。将初始体重为6.37±0.07 g的大口黑鲈幼鱼随机分到9个循环水玻璃缸（体积为250 L）中,每个处理组设置3个重复,每个重复分配20尾鱼。养殖试验的周期为8周,采用表观饱食投喂模式。结果表明,虽然HC组的饲料效率上升,但与LC组相比,HC组的摄食率和生长性能下降。随着饲料淀粉水平增加,大口黑鲈肝脏糖原含量逐渐上升,这可能是HC组肝体比增加的原因。H＆E、Masson和TUNEL染色表明,投喂高淀粉饲料会破坏大口黑鲈肝细胞结构的完整性,诱导炎症反应、细胞凋亡及纤维化。KEGG富集分析表明,与LC组相比,HC组的差异表达基因主要富集在Apoptosis、Toll-like receptor、NOD-like receptor和Hedgehog信号通路中。转录组分析显示,高淀粉饲料通过PI3K/Akt/NF-κB信号轴促进促炎趋化因子因子（干扰素诱导蛋白,ip-10）和促炎因子（白细胞介素-8,il-8）的释放,进而诱导肝脏炎症反应。凋亡信号在HC组产生后,通过Hedgehog信号通路激活了GliA/Gli信号轴,导致细胞外基质蛋白（I型胶原蛋白,col1a1）增加,促进肝星状细胞的活化而诱导肝脏纤维化。高淀粉饲料通过Fas-L/Fas/FADD信号通路活化了caspase 8,进而诱导大口黑鲈肝细胞凋亡。此外,在Apoptosis信号通路中的存活因子会通过PI3K/Akt信号通路减少线粒体中diablo的释放,解除了其对X连锁凋亡抑制蛋白（xiap）的抑制,进而发挥凋亡抑制作用,这很可能是大口黑鲈体内自主启动的凋亡抑制程序。3.饲料蛋白水平对大口黑鲈生长、饲料利用、血清生化和肝脏健康的影响本试验配制了三组不同蛋白水平的饲料,分别为低蛋白组（LP,44%蛋白）、中蛋白组（MP,49%蛋白）和高蛋白饲料（HP,54%蛋白）。将初始体重为6.42±0.03 g的大口黑鲈幼鱼随机分到12个循环水玻璃缸（体积为200 L）中,每个处理组设置4个重复,每个重复分配20尾鱼。养殖试验的周期为8周,采用表观饱食投喂模式。结果表明,饲料中不同蛋白水平并不影响大口黑鲈幼鱼的生长性能和饲料利用。随饲料蛋白水平升高,大口黑鲈肝脏蛋白含量逐渐增加。与其它处理组相比,血清中谷草转氨酶（AST）和谷丙转氨酶（ALT）的活性在HP组最低,结合H＆E和TUNEL染色结果,HP组大口黑鲈肝组织的完整性最佳且肝细胞凋亡信号最少。在分子层面,大口黑鲈肝脏中促炎基因（白细胞介素-1β,il-1β）和促凋亡基因（B淋巴细胞瘤-2相关的X蛋白质,bax;半胱天冬氨酸特异性蛋白酶7,caspase7）的表达量随着饲料蛋白水平增加而降低,并且HP组与LP组之间差异显著。综合血清生化、肝组织形态和基因表达结果,本实验结果表明,虽然饲料蛋白水平升高并不影响大口黑鲈的生长,但有利于大口黑鲈的肝脏健康。