猪瘟是由猪瘟病毒(CSFV)引起的猪的一种热性、全身性出血、败血性传染病,以很强的传染性和高致死率为特征,不同品种、年龄、性别的猪均易感。猪瘟的流行给养猪业造成惨重的经济损失。近年来猪瘟免疫失败的报道较多,也出现了一些新的流行特点,造成这种结果的原因是多方面的,其中猪瘟病毒变异也可能是原因之一。因此,开展猪瘟流行病学调查,掌握猪瘟的流行规律及病毒变异情况,加强猪瘟防控相关技术研究具有非常重要的现实意义。本研究首先在山东省开展猪群健康状况调查的基础上,采取问卷调查、现场临床调查、病例剖检、免疫抗体检测等方法,对山东17个市50个县(市、区)的144个养殖场的猪瘟(CSF)感染情况进行流行病学调查。在144份问卷中,共调查种猪场33个,规模场50个,散养户61个,部分养猪场存在着母猪流产、死胎、仔猪成活率低等现象,对242个场点采集的11241份血清样品进行猪瘟免疫抗体检测,样品抗体合格数为6379份,抗体合格率为56.75%。通过现场临床调查和查看山东省70个兽医门诊剖检诊断记录,发现2011年5月-2012年8月,诊断疑似猪瘟病例累计达93例,进一步证实了CSF的存在,说明了CSF仍然是危害山东养猪业发展的主要动物疫病之一,应加强对该病的防控工作。利用IDEXX公司的猪瘟抗体、抗原检测试剂盒对2011年7月至2012年1月来自山东省不同地区的16个规模化免疫猪场的猪群做了免疫抗体和病毒感染抗原检测,其中对此16个猪场共1080份血清进行了抗体水平检测,另对这16个猪场中免疫状况较差的6个猪场的363份血清进行了抗原检测,结果抗体阳性率在43.28%-87.75%之间,抗原阳性率在0%-4.48%之间,说明所检测的种猪场猪瘟免疫水平参差不齐,部分种猪场免疫效果较差,达不到理想的保护率,同时证实部分免疫猪群存在猪瘟带毒现象。我们从上述免疫水平较低的猪场中送检的13份病料进行了RT-PCR检测,共鉴定出8份病料猪瘟阳性,将病料处理后接种PK-15细胞,成功分离到8株猪瘟病毒,分别命名为SDWF、SDTA、SDCQ、SDDY、SDWH、SDZB、SDLC和SDZZ,对这8株猪瘟毒株经实时荧光定量检测,证明均为流行野毒株,从而进一步证实免疫猪场的确存在猪瘟带毒现象,因此在实际生产中,应对猪群的猪瘟抗体水平进行定期监测,科学免疫,使猪瘟抗体保持在较高水平,以防止野毒的入侵。利用分子生物学技术,我们对已分离的8株猪瘟毒株进行Erns基因编码序列的扩增、克隆并测序,利用DNAstar软件对测序结果和推断的蛋白序列与Shimen株、HCLV株,Paderborn株等28株经典猪瘟毒株进行比对和变异分析,8个毒株和其他12个参考毒株的氨基酸序列,Erns具有两个保守区(CRs),分别位于aa28-36和75-82区域。流行毒株与疫苗株在CR1区域存在差异,位于36位点的氨基酸E被G所取代。序列中位于30和79位的H(组氨酸)为RNase催化活性关键氨基酸残基,此位点高度保守。结果发现分离毒株Erns基因之间的无论核苷酸同源性还是蛋白质同源性都很高。这些毒株分为两个基因群,4个亚群,8个毒株属于subgroup1.1a,此亚群是有德国株Paderborn、1个台湾毒株和2个国内株组成的,同源性在93-99%之间,由此可以推测该亚群病毒拥有共同的祖先；与subgroup1.1b的同源性在91-92%之间；而与group2中参考序列的同源性比较在84-86%之间。