目的：　　胃癌是一种发病率、死亡率很高的恶性肿瘤，早期胃癌诊断率低，患者就诊时多数已进入中晚期，其治疗的主要方法为手术及辅助化疗。传统的化疗药物虽然治疗效果较好，但是其副作用较大致使病人难以承受。因此人们正在致力于寻找高效、低毒的胃癌辅助治疗方法。近年来随着表观遗传学的深入研究，靶向表观遗传学修饰的酶或蛋白质进行治疗是目前肿瘤领域研究的热点。　　组蛋白乙酰化是一种重要的表观遗传学修饰，由组蛋白乙酰基转移酶(HistoneAcetyltranferase，HAT)和组蛋白去乙酰化酶(Histone Deacetyltranferase，HADC)共同调控。许多研究表明组蛋白去乙酰化酶(HDACs)高表达是肿瘤发生发展的重要分子事件，抑制HDACs表达或活性将对胃癌等肿瘤的治疗起重要作用。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors，HDACi)是一组抑制组蛋白去乙酰化酶的小分子化合物，能够诱导肿瘤细胞生长停滞、分化或细胞凋亡。曲古抑菌素A(TSA)是研究较多的一种去乙酰化酶抑制剂。研究结果表明TSA作用机制十分复杂，影响诸多基因表达，但是有些基因可同时影响肿瘤的多种表型，它们可能是TSA下游发挥更重要作用的基因，研究TSA对这类基因的调控，则有望进一步阐明TSA作用的分子机制，并可能发现预测肿瘤对TSA反应的标志物。　　S100A4属于S100蛋白家族成员，研究表明S100A4是一种影响肿瘤多种表型的重要基因，能够影响肿瘤细胞增殖、凋亡、迁移以及化疗敏感性等。因此本文拟研究TSA对S100A4的调控及机制，并探讨S100A4是否影响TSA对胃癌细胞生物学特性的调控，本研究将有助于加深理解TSA对胃癌影响的分子机制，并有助于发现能够预测胃癌对TSA治疗反应的标志，为指导胃癌的表观遗传治疗提供新线索。　　方法：　　1、实验材料:人胃癌细胞系BGC823;克隆载体pMD18-T simple Vector;pGL3-Basic vector;大肠杆菌JM109感受态细胞;S100A4 shRNA真核表达载体;　　2、实验方法:通过Real-time RT-PCR、RT-PCR及Western blotting检测TSA处理对S100A4表达的影响;构建S100A4第一内含子区系列截短的荧光素酶报告基因载体，转染BGC823细胞，应用荧光素酶分析仪检测TSA处理前后S100A4第一内含子区系列截短的荧光素酶报告基因活性改变;应用MTT法、流式细胞术和Transwell法分别检测TSA处理前后细胞的增殖、凋亡和体外迁移力改变;转染S100A4表达载体同时用TSA处理进行回复实验，应用MTT法、流式细胞术和Transwell法分别检测细胞的增殖、凋亡和体外迁移力改变。　　结果：　　1、组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA下调S100A4基因的表达。　　2、成功构建S100A4第一内含子区系列截短的荧光素酶报告基因载体，转染BGC823细胞，结果显示TSA对S100A4的第一内含子区+550到+710区域调控作用明显。　　3、TSA处理使胃癌BGC823细胞凋亡率增加。分别转染pcDNA3.1-empty表达载体和pcDNA3.1-S100A4表达载体，同时用TSA处理进行回复实验，结果表明，与转染pcDNA3.1-empty表达载体组相比，转染pcDNA3.1-S100A4表达载体组细胞凋亡率降低。　　4、TSA处理使胃癌BGC823细胞增殖力降低。分别转染pcDNA3.1-empty表达载体和pcDNA3.1-S100A4表达载体，同时用TSA处理进行回复实验，结果表明，与转染pcDNA3.1-empty表达载体组相比，转染pcDNA3.1-S100A4表达载体组细胞增殖力增强。　　5、TSA处理使胃癌BGC823细胞体外迁移力减弱。分别转染pcDNA3.1-empty表达载体和pcDNA3.1-S100A4表达载体，同时用TSA处理进行回复实验，结果表明，与转染pcDNA3.1-empty表达载体组相比，转染pcDNA3.1-S100A4表达载体组细胞迁移力增强。　　结论：　　1、组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA下调S100A4基因的表达。　　2、TSA对S100A4的第一内含子区+550到+710区域抑制作用明显。　　3、S100A4介导TSA对胃癌细胞增殖、凋亡和迁移力的影响。