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目的:桥本甲状腺炎(Hashimoto thyroiditis,HT)是一种器官特异性的自身免疫性疾病,其甲状腺球蛋白抗体(anti-thyroglobulin antibody,ATG)和甲状腺过氧化物酶抗体(anti-thyroid peroxidase antibody,ATPO)等自身抗体均显著升高是HT发病的重要机制,但其原因尚未很好阐明。通过检测桥本甲状腺炎患者外周血2型固有免疫淋巴细胞(Group II innate lymphoid cell,ILC2)特征性细胞因子(IL-5、IL-13)和转录因子(retinoid-related orphan receptorα,RORα)的表达水平,并对其与血浆ATG和ATPO水平的相关性进行了分析,探讨ILC2的活性与桥本甲状腺炎患者产生的自身抗体的关系;同时检测桥本甲状腺炎患者外周血B10的特征性细胞因子IL-10的表达水平,对其与血浆ATG和ATPO水平也进行了相关性分析,探讨IL-10与桥本甲状腺炎患者产生的自身抗体的关系。方法:1、选取在江苏大学附属人民医院就诊的30例桥本甲状腺炎患者,患者均在本院初次获诊断,其中女26例,男4例,平均年龄(41±14)岁,所有患者诊断均符合《中国甲状腺疾病诊治指南》中相关标准。对照组为健康体检者,其中女25例,男5例,平均年龄(44±10)岁,无甲状腺疾病、自身免疫性疾病及家族史。2、采用免疫化学发光法(化学发光分析仪为美国Beckman Coulter公司的LDX800)检测血浆ATG、ATPO、游离三碘甲腺原氨酸(Freetriiodothyronine,FT3)、游离甲状腺素(free thyroxine,FT4)、促甲状腺激(Thyroid Stimulating Hormone,TSH)水平。3、利用Ficoll-泛影葡胺密度梯度离心法分离桥本甲状腺炎患者的外周血单个核细胞,提取总RNA。用分光光度计测量OD260/280值,计算RNA浓度及纯度。4、采用实时荧光定量PCR分析桥本甲状腺炎患者外周血ILC2转录因子(RORα)和特征性细胞因子(IL-5、IL-13)的m RNA表达水平,以及B10特征性细胞因子(IL-10)的m RNA表达水平。5.通过酶联免疫吸附试验检测血浆中ILC2特征性细胞因子(IL-5、IL-13)蛋白的表达水平,以及B10特征性细胞因子(IL-10)蛋白的表达水平。6、应用Graphpad5.0软件进行统计学分析,两组间的比较采用非配对Student-t检验,相关性分析用Pearson法,以P<0.05为具有统计学意义。结果:1、桥本甲状腺炎患者的血浆中ATG和ATPO均明显升高,而FT3稍有降低,FT4下调明显且TSH显著升高,呈现出明显的桥本甲状腺炎的病理特征。2、实时荧光定量PCR结果显示,桥本甲状腺炎患者外周血ILC2转录因子RORα和特征性细胞因子IL-5、IL-13的m RNA表达水平均明显高于健康对照者,提示在桥本甲状腺炎患者中的ILC2活性水平是升高的。而B10特征性细胞因子IL-10的m RNA表达水平有下降趋势。3、酶联免疫吸附试验结果显示,与健康对照者相比桥本甲状腺炎患者血浆中ILC2特征性细胞因子IL-5、IL-13表达水平是显著增高的,B10特征性细胞因子IL10是显著降低的。4、基于桥本甲状腺炎患者ILC2相关分子和患者血浆自身抗体水平分析的基础上,开展了IL-5、IL-13及RORα的表达水平和患者血浆自身抗体ATG和ATPO的相关性进行了分析。结果表明,RORα的表达水平与ATPO、ATG的血浆含量均呈现明显正相关;IL-5的表达水平与ATPO的血浆含量是正相关的,IL-5与ATG及IL-13的表达水平与ATG、ATPO的血浆含量存在着正相关的趋势;IL-10的表达水平与ATPO的血浆含量存在显著负相关,IL-10与ATG的血浆含量存在着负相关的趋势,但差异不显著,有待进一步的探讨。结论:HT患者甲状腺自身抗体水平的升高与ILC2活性增强及IL-10水平下降关系密切,这可能是HT发病的重要免疫学机制。