前列腺癌是泌尿系常见的恶性肿瘤，近年来在我国的发病率呈逐年上升趋势。对雄激素非依赖型前列腺癌缺乏有效的治疗是目前前列腺癌临床治疗中最大的难题。细胞凋亡是当前生物医学的热点之一，研究表明其在肿瘤发生、清除、转化及抗肿瘤药物治疗方面有重要作用。羟基喜树碱是从我国特有的中药喜树中提取的抗癌药，为拓扑异构酶Ⅰ抑制剂，国外研究表明喜树碱类抗癌药可诱导膀胱癌、胃癌、肝癌、前列腺癌等多种肿瘤细胞凋亡。但有关羟基喜树碱诱导前列腺癌细胞凋亡的研究尚未见报道。本实验对羟基喜树碱诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡进行研究，以探讨其能否诱导PC-3细胞凋亡及抗肿瘤机制，为临床治疗前列腺癌提供实验资料。目的：研究羟基喜树碱体外诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡的作用，探讨其治疗前列腺癌的机制。方法：采用MTT法检测羟基喜树碱对人前列腺癌PC-3细胞生长的抑制作用。应用光学显微镜、倒置显微镜观察、荧光显微镜和电子显微镜观察前列腺癌PC-3细胞凋亡的形态学特征，流式细胞仪定量检测细胞凋亡的百分率，琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂片段。结果：MTT法检测结果表明羟某喜树碱0、10^-6、10^-5、10^-4、10^-3、10^-2、10^-1mg/ml作用于前列腺癌PC-3细胞，能明显地抑制细胞生长，呈时间、剂量依赖性。应用IC50计算公式算出给药12h、24h、48h的IC50分别为：6.42×10^-3、1.37×10^-3、2.92×10^-4mg/ml。光学显微镜和电子显微镜观察到PC-3细胞凋亡的形态学表现为染色质凝集，胞浆浓缩，核固缩，可见凋亡小体。倒置显微镜可见细胞回缩变圆，体积缩小，核染色质凝集，核碎裂及凋亡小体形成。荧光显微镜可见凋亡的PC-3细 羟基喜树碱诱导前列腺癌PC－3细胞凋亡的实验研究 中文摘要 胞呈绿色光环状。DNA琼脂糖凝胶电泳呈梯形条带，流式细胞仪检测 到凋亡峰，可计算凋亡百分率，并表明HCPT诱导的前列腺癌PC上细 胞凋亡主要位于细胞周期的S期。 结论：羟基喜树碱体外对PC上细胞具有较强的细胞毒作用，并且可以 诱导前列腺癌PC刁细胞凋亡，凋亡主要发生在细胞周期的S期，羟基 喜树碱诱导细胞凋亡是其抗肿瘤的主要机制之一。羟基喜树碱可以考 虑应用于临床治疗雄激素非依赖型前列腺癌。