不同类型骨水泥对椎旁转移瘤细胞毒作用的实验研究

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目的探讨磷酸钙骨水泥(CPC)和聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥(PMMA)对实验兔椎旁转移瘤的细胞毒作用,研究动物椎旁转移瘤模型代替脊柱肿瘤模型进行实验研究的可行性。材料及方法1. CT定位下经皮穿刺瘤块推送法建立实验兔VX2椎旁转移瘤模型。15天后MRI检查模型建立情况。2.模型兔随机分为3组:①对照组:模型兔无任何处理。②PMMA组:模型兔肿瘤内注入PMMA骨水泥。③CPC组:模型兔肿瘤内注入CPC骨水泥。3.对照组不做处理,CPC组及PMMA组在CT定位下向椎旁转移瘤中心分别注入CPC或PMMA骨水泥1.0ml。骨水泥注入后每组分别于1天、7天、14天后处死5只荷瘤兔,取出肿瘤组织,10%甲醛固定。标本切取两部分:骨水泥表面肿瘤组织、骨水泥远端肿瘤组织(对照组取肿瘤中心和边缘),经冲洗、脱水、透明、包埋、制成蜡块后切片。4.①骨水泥注入后每天观察动物生理状态;②HE染色法观察骨水泥表面及边缘肿瘤细胞形态变化及坏死情况;③TUNEL细胞原位凋亡检测,观察肿瘤细胞凋亡并计算凋亡指数,所得数据采用SPSS13.0统计软件包行统计学分析。结果①模型动物均能很好的耐受手术,骨水泥注入后成团状,无明显的渗漏。术后实验动物无明显的生理不适,无精神萎靡、嗜睡、拒食等现象;②HE染色结果显示PMMA组术后骨水泥表面肿瘤细胞发生不同程度的坏死,细胞出现典型的核浓缩、核分裂、核溶解、胞浆溶解红染,在坏死的肿瘤组织中可见少许残存的肿瘤细胞,尤以骨水泥远端较多见,7天及14天后骨水泥表面肿瘤细胞较第1天有明显增生,边缘及周边肿瘤细胞增生活跃;对照组和CPC组各时间段均显示骨水泥表面和边缘肿瘤组织增生活跃;③TUNEL细胞原位凋亡检测结果显示:各时间点内PMMA组骨水泥表面肿瘤细胞凋亡较周边多,治疗后第1天差异较为明显,以后逐渐减少。对照组和CPC组骨水泥表面及周边细胞凋亡不明显。PMMA组各时间点骨水泥表面及周边肿瘤细胞凋亡较对照组和CPC组明显增加,两者比较有统计学意义(P<0.05)。CPC组和对照组则无明显差异,两者比较无统计学意义(P>0.05)。结论PMMA具细胞毒性,对活体肿瘤细胞具有一定的杀伤作用,CPC则没有明显的肿瘤杀伤作用。实验兔椎旁转移瘤模型建立比较容易,可能作为动物脊柱肿瘤模型进行有关实验研究。
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