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补体系统的经典途径是无脊椎动物免疫的第一道防线。C1q是经典补体途径的目标识别蛋白,对清除病原体和凋亡细胞至关重要。C1q能够通过它自身的异源三聚球状C1q结构域广泛地结合“自己”和“非己”的配体,引起经典途径。文蛤(Meretrix meretrix)属于软体动物门(Mollusca)、双壳纲(Lamellibranchia)、异齿亚纲(Heterodonta)、帘蛤目(Veneroida)、帘蛤科(Veneridae)、文蛤属(Meretrix),是一种重要的经济贝类,也是我国主要出口的鲜活水产品之一。本文采用基因克隆的方法,得到了文蛤C1q基因(MmC1q) cDNA全长序列(GenBank收录号HQ850699), MmClq基因全长为1,213bp,5’端非编码区(UTR)为316bp,3’UTR为372bp,在polyA尾上游43bp处存在加尾信号序列AATAAA。开放阅读框525bp,编码174个氨基酸。MmClq氨基酸序列N端含有一个信号肽序列和一个典型的Clq结构域(第26-163位)。MmClq蛋白的空间结构预测发现,MmClq结构域是由9个B折叠形成的,含8个保守的氨基酸残基(Phe33, Try55, Asn60, Phe69, Gly75,Tyr77,Phe152和G1y154),其中5个芳香族氨基酸参与形成疏水核心结构。MmClq蛋白的Clq结构域与软体动物中的唾液酸结合凝集素、两栖类动物和脊椎动物中的Clq结构域都具有较高的同源性。通过荧光定量PCR, MmC1qmRNA在文蛤肝胰脏组织中表达量最高。文蛤受鳗弧菌感染后,Clq的mRNA相对表达水平有明显的上升调节,在注射2h时,MmC1q mRNA表达量最高。我们可以推论MmClq是文蛤机体在免疫防御中重要的组织合成蛋白并且参与了对外源微生物的免疫防御效应。为了从蛋白水平上验证Clq的功能,包含成熟肽的MmC1q cDNA片段被重组并在大肠杆菌BL21(DE3)载体中进行体外表达,利用考马斯亮蓝(Camas brilliant blue)总蛋白定量测试盒测定MmClq蛋白质量浓度为1.4867g/L,采用牛津杯法(oxfprd-cup tests)对MmClq重组蛋白进行体外抑菌试验,但是并未检测到明显的抑菌活性。