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目的目前,肿瘤生物治疗存在的最大问题是如何提高特异性杀瘤效率和抑制肿瘤细胞的免疫逃避。提高特异性杀瘤作用的方法主要是通过增强抗原提呈细胞的功能或通过增强T细胞活化第一信号和共刺激信号来增强T细胞的激活;肿瘤细胞的逃避机制是很复杂的,其中一个重要的机制是共刺激分子表达或功能的异常。因此对共刺激分子表达或功能的调控是肿瘤免疫治疗的一个重要方向,4-1BBL和sPD-1通过不同的机制调节免疫应答、促进肿瘤免疫治疗作用。本文探讨了4-1BBL和sPD-1联合治疗肿瘤的效应和相关的免疫学机制。方法以H22肝癌细胞接种于BALB/c小鼠右后腿肌肉内,建立小鼠肿瘤模型,接种后将小鼠随机分为4组,每组13只小鼠。各治疗组均是采用4-1BBL和可溶性PD-1(sPD-1)真核表达质粒通过肌肉转染进行基因治疗;在瘤细胞接种部位进行肌肉注射质粒,进行局部基因转染。接种H22细胞后的第2天开始注射:pcDNA3.1组注射质粒pcDNA3.1作为对照,4-1BBL组和sPD-1组分别注射质粒p4-1BBL和pPD-1A,4-1BBL+sPD-1组为联合治疗组,同时注射质粒p4-1BBL和pPD-1A;检测小鼠肿瘤生长情况,并检测转染基因及肿瘤微环境中免疫调控相关基因的表达;肿瘤组织切片进行HE染色,观察各组治疗后肿瘤细胞形态学改变。结果单独转染4-1BBL基因或sPD-1基因均显示出抗肿瘤作用,而联合治疗对肿瘤生长抑制作用更为明显,该组抑瘤率高达92.3%(以pcDNA3.1组为对照),显著高于4-1BBL组(78%)、sPD-1组(70.2%)。联合治疗不仅使TGF-β、IL-10的表达下调,而且在治疗后期更有效地促进IFN-γ和IL-2基因表达上调。结论4-1BBL和sPD-1联合治疗可使肿瘤微环境中的免疫相关基因表达更有利于抗肿瘤免疫应答,增强肿瘤免疫治疗效果。