Sasm05菌株提高东南景天锌富集的作用机制研究

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超积累生态型东南景天(Sedum alfredii Hance)是我国原生的锌(Zn)/镉(Cd)超积累植物,对重金属污染土壤具有较好的修复潜力,但其生物量较小,修复效率亟需进一步提高。近年来,利用植物促生菌提高植物修复效率已成为国内外研究的热点。本研究以东南景天及其茎中分离的特异内生菌荧光假单胞杆菌Sasm05为材料,通过溶液培养试验,采用三亲结合法、激光共聚焦显微镜分析、电感耦合等离子体质谱分析(ICP-MS)、实时定量PCR(q-RT-PCR)等技术研究了强化接种Sasm05对东南景天锌吸收与转运的影响及其生理机制,取得的主要研究成果如下:1、通过三亲结合法对Sasm05进行了绿色荧光蛋白(GFP)标记,利用激光共聚焦显微镜观察发现强化接种的Sasm05进入到了植物的根表、根内和茎中。随着Zn处理浓度的增加,东南景天地上部与根系的生物量与Zn浓度均显著增加。接种Sasm05后,地上部生物量比未接种对照增加了 37.3%-59.2%,根系生物量增加了 58%-108%;地上部的Zn浓度增加了 16.7%-54.7%,根系的Zn浓度增加了 37%-40.6%;叶绿素含量增加了 35.5%-56.2%。同时,Sasm05显著增加了 HMA、Nramp和ZIP等转运蛋白基因的表达量。2、研究了强化接种Sasm05对东南景天锌吸收转运动力学的影响,发现随着培养时间的增加,植物生物量显著增加;在200 μMZn处理浓度下,30 d时地上部和根系的生物量增幅最大,分别为262%和421%;接种Sasm05进一步提高了地上部和根系的生物量,增幅为34.5%和46.8%。相比未接种对照,Sasm05提高了植物体内的Zn浓度(9.2%-120%),叶绿素含量(15.3%-69.8%)以及金属离子转运蛋白基因的表达量,其中根系Nramp1的表达量增加了 2.5-34.2 倍。3、比较了强化接种Sasm05和IAA处理对东南景天根系发育和锌吸收转运的作用效应。发现IAA对根系生物量的影响主要表现为低浓度促进,高浓度抑制,确定促生效应最佳的IAA浓度为11μM。Sasm05和IAA均可提高地上部锌的积累量,其中Sasm05显著增加了植物地上部的生物量,其促生效应比IAA更强;并且可促进Zn、Ca、Fe、Mg、Mn、Cu等金属离子在植物植物地上部和根系的浓度,而IAA作用效果不明显。进一步分析发现,Sasm05与IAA均影响Nramp1和IRT1等转运基因的表达,但两者的作用效应并不一致,说明Sasm05不仅可能通过分泌IAA发挥促生作用,还可能直接影响相关基因的表达进而调节重金属的吸收运输,从而调控植物体内的重金属浓度以达到提高东南景天锌富集的效应。
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