肌切蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及其在顺铂耐药性中作用的研究

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目的:在基因和蛋白水平分别探讨肌切蛋白(scinderin,SCIN)在上皮性卵巢癌中的表达情况并探讨其临床意义;比较人上皮性卵巢癌细胞株SKOV3与其亲本顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP中肌切蛋白表达差异;观察小分子干扰RNA(smallinterfering RNA, siRNA)介导的肌切蛋白沉默对顺铂(cisplatin,DDP)诱导的SKOV3/DDP细胞增殖及凋亡的影响。方法:运用Real-time PCR法和Western blot法分别检测34例上皮性卵巢癌、21例良性卵巢肿瘤和20例正常卵巢组织中肌切蛋白mRNA和蛋白的表达情况,并进行临床资料统计,分析肌切蛋白与卵巢癌临床病理参数间的关系;比较人卵巢癌细胞株SKOV3及其亲本顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP中肌切蛋白的表达差异;小干扰RNA技术干扰卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP中肌切蛋白基因表达,并经Real-time PCR验证干涉效率;MTT法检测SKOV3/DDP细胞转染肌切蛋白小干扰RNA后对顺铂敏感性的改变;流式细胞术检测转染肌切蛋白小干扰RNA后,顺铂诱导的SKOV3/DDP细胞凋亡率的变化。结果:上皮性卵巢癌组织中肌切蛋白mRNA及蛋白表达量显著高于良性卵巢肿瘤组织和正常卵巢组织(P均<0.05),而在正常卵巢组织与良性卵巢肿瘤组织中,肌切蛋白mRNA及蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。肌切蛋白mRNA和蛋白表达与患者的病理分级、淋巴结转移有统计学相关性(P均<0.05),而与患者的年龄、肿瘤临床分期无相关性(P均>0.05)。肌切蛋白mRNA在卵巢癌顺铂耐药株SKOV3/cDDP细胞中表达高于SKOV3细胞(P<0.05);顺铂对转染肌切蛋白小干扰RNA的SKOV3/DDP细胞的半数抑制浓度(half inhibitionconcentration,IC50)值及耐药系数(RF)明显低于对照组细胞(P均<0.05),转染肌切蛋白小干扰RNA后,顺铂诱导的SKOV3/DDP细胞凋亡率显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:肌切蛋白在上皮性卵巢癌中表达上调,且在低分化卵巢癌中表达高于高分化卵巢癌,有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者,肌切蛋白沉默可促进顺铂诱导的卵巢癌耐药细胞凋亡,在一定程度上逆转卵巢癌顺铂耐药。提示肌切蛋白与卵巢癌患者的不良预后相关,可能在卵巢癌顺铂耐药中发挥重要作用,可作为判断卵巢癌预后及顺铂耐药的生物学标志物。
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