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野牛草[Buchloe dactyloides (Nutt.) Engelm]为禾本科野牛草属雌雄异株植物,原产于北美大草原,由于抗旱性强、养护管理费用低,已成为我国北方地区栽种最广泛的暖季型草坪草。雌雄异株植物在所有植物中的比例只占到一小部分,但却是研究植物性别决定与进化的重要材料。本论文在形态学及生物分子学研究基础上,利用SRAP标记对野牛草进行雌雄性别的分子标记研究,可为野牛草早期性别鉴定以及雌雄单株选育提供理论基础,同时利用蛋白质双向电泳技术分离性别决定前后差异蛋白质,为进一步认识野牛草性别分化机理提供有力依据。研究结果如下:(1)利用序列相关扩增多态性(SRAP)和混合分离群体分析法(BSA)方法,对野牛草雌性、雄性DNA池进行分离。在228对SRAP引物组合中有207对引物能扩增出条带,共扩增出2690条带,有19对引物组合能在雌雄DNA池之间中扩增出差异条带。其中只有引物组合ME9/EM2能扩增在单株中出特异条带,此特异条带在所有雌株中存在,而在所有雄株中缺失,分子量大约为240bp,为雌株特有条带。(2)利用蛋白质双向电泳技术,对野牛草性别决定前后花序全蛋白进行分离比较在野牛草性别决定前后,共有18个蛋白质点差异表达。其中12个蛋白质是不同发育时期,雌、雄花所共有的,仅在表达量上存在差异;4个蛋白质点在雌、雄花分化前表达,而分化后都消失;另外分别找到与野牛草雌花、雄花分化密切相关的特异蛋白质点H和N,通过分析推测蛋白质H是导致雌花中雄蕊败育的一种重要蛋白,蛋白质N则是导致雄花中雌蕊败育的重要蛋白。本论文利用SRAP分子标记在野牛草雌性植株中找到一条与性别有关的特异条带,可以用于野牛草性别鉴定。对野牛草性别决定前后花序蛋白质进行双向电泳分离比较,分离出与野牛草性别分化时雌雄花发育密切相关的蛋白质,从分子水平阐明雌雄花发育差异。鉴于野牛草是禾本科中少有的雌雄异株植物,本论文研究为植物性别分化研究提供了新材料,同时也为从分子水平上鉴定植物性别提供了新途径。