反式茴香脑和球孢白僵菌对桃蚜的联合杀虫作用及对其GSTs基因表达的影响

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桃蚜(Myzuspersicae)属半翅目蚜科,为世界性重要害虫。长期使用化学农药使桃蚜产生抗药性,反式茴香脑和球孢白僵菌均具有作为生物杀虫剂的潜力,但两者混用来防治桃蚜鲜有报道。本研究通过将两者混用来探索反式茴香脑对球孢白僵菌是否具有杀蚜增效作用,并在此基础上,进一步探讨反式茴香脑和球孢白僵菌处理桃蚜后谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)基因的表达模式,从分子水平初步研究GSTs是否对反式茴香脑和球孢白僵菌的胁迫具有响应。研究结果总结如下:1反式茴香脑和球孢白僵菌对桃蚜的生物测定使用球孢白僵菌Bbr84菌株单独处理桃蚜,结果表明:浓度为108孢子/mL的孢子悬浮液致死效果最好,处理6 d的校正死亡率和LT50分别为82.96%和3.83 d;将浓度分别为0.0375、0.0750、0.1500和0.3000 mg/mL的反式茴香脑与浓度为7×107孢子/mL的球孢白僵菌混用,处理5 d后桃蚜的校正死亡率分别为56.83%、88.64%、64.78%和53.42%,由此可知,0.0750 mg/mL的反式茴香脑和浓度为7×107孢子/mL的球孢白僵菌混合使用后对桃蚜致死效果最好。2桃蚜GSTs基因的鉴定和生物信息学分析通过检索桃蚜的转录组,鉴定出9条GSTs基因的cDNA序列(MperGSTd1、MperGSTd2、MperGSTd3、MperGSTo1、MperGSTs1、MperGSTs2、MperGSTs6、MperGSTt1和MperGSTt2a)。9个cDNA的编码区长度介于132-185bp之间。利用生物信息学工具对序列进行分析,并构建了系统发育树,明确了桃蚜这9个GSTs基因所属的家族,此外还发现这9个基因编码区的蛋白质与半翅目昆虫GSTs亲缘关系较近,而与其它物种GSTs亲缘关系较远。3反式茴香脑和球孢白僵菌对桃蚜GST酶活性和GSTs基因表达的影响分别使用0.25 mg/mL的反式茴香脑和孢子悬浮液浓度为108孢子/mL的球孢白僵菌处理桃蚜,在3 h、6 h和12 h后收集试虫测定GST酶活性,结果显示反式茴香脑处理的GST酶活性受到抑制,球孢白僵菌处理的GST活性升高。桃蚜9条GSTs基因在不同发育阶段及分别应对反式茴香脑和球孢白僵菌胁迫表达量均有差异。大部分基因在4龄若蚜期的表达量较高,在反式茴香脑和球孢白僵菌分别胁迫下,不同时间段处理的GSTs基因表达量显著变化,有的表达量上调至对照组10倍以上。
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