纳米硒对六价铬致鸡肝癌细胞脂代谢损伤的防治作用

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铬(Cr)是一种具有多种价态的金属元素,原子序数为24,广泛存在于自然界,畜牧业中常常使用含铬的饲料添加剂,可以有效提高饲料的利用率并增强畜禽的体质。然而错误的使用方式会使铬元素在体内蓄积,会对动植物和人类产生严重的威胁。肝脏是重金属铬入侵机体并发生蓄积最主要的靶器官,研究表明六价铬会使肝脏细胞发生氧化应激以及脂、糖代谢损伤等严重的病理反应。纳米硒是近来开发的一种新的单质硒形态,具有抗氧化、免疫调节以及抗衰老等功能,并且纳米硒较一般的无机硒和有机硒而言生物毒性更低。急性毒性方面,亚硒酸钠约为纳米硒的7~22倍,硒酵母是纳米硒的4~22倍。为了探讨纳米硒对六价铬致鸡肝癌细胞(LMH细胞)脂代谢损伤的保护作用,从相应生化指标与调节脂代谢通路上的关键基因入手,研究纳米硒对LMH细胞的保护功能作用。试验以鸡肝癌细胞(LMH cells)为对象,用重铬酸钾和纳米硒单独及共同处理细胞。试验共分为4个组,对照组(C):不添加;Cr(Ⅵ)攻毒组(A):加入重铬酸钾溶液20μmol/L,染毒24h;纳米硒治疗组(T):加入中毒组铬的剂量,12h后加入纳米硒8μg/L;和纳米硒预防组(P):先加入治疗组硒的剂量,12h后加入中毒组铬的剂量,每组3个重复。试验分别在处理后的24h、48h和72h三个时间点对不同组细胞进行形态学观察,并用Cell Counting Kit-8细胞计数试剂进行增殖率检测,然后对生化指标甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白固醇(LDL-C)进行测定,并用RT-q PCR和Western Blot检测ACACA和FASN两个基因和蛋白的差异性表达。以此来探索纳米硒是否对铬中毒的细胞具有保护作用。试验结果显示:(1)在Cr(Ⅵ)的影响下,LMH细胞密度和增殖率显著降低,部分细胞形态发生改变,存活率相比于对照组显著降低(P<0.05)。分别在六价铬处理细胞的12h之前和之后加入纳米硒,均能够显著的改善铬引起的增殖率降低的现象(P<0.05)。(2)铬引起LMH脂代谢损伤,会引起TG与LDL-C的含量升高,加入纳米硒后,两者的含量得到显著的降低(P<0.05)。(3)铬中毒后,LMH细胞的ACACA和FASN基因与蛋白的表达升高,而纳米硒可以显著的减少铬诱导的上述基因与蛋白的表达变化(P<0.05)。结果表明,纳米硒能够有效的减轻六价铬对LMH细胞的损伤作用,该结论可以为重金属铬诱导动物机体损伤机制的研究提供一定的理论基础,并为开发重金属中毒保护药物提供思路。
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