紫薯提取物对果蝇和线虫抗氧化作用的研究

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紫薯又名黑薯,富含花青素等多种活性成分,具有很高的药用价值和食用价值。本论文以黑腹果蝇(Drosophila Melanogaster)和秀丽隐杆线虫(Caenorhabditiselegans)为实验模式生物,对体内抗氧化活性进行了研究,以此评价紫薯提取物(Purple sweet potato extract,PSPE)的抗氧化能力及调控衰老的作用,并对其作用的分子机制进行初步探讨,为深入探究PSPE的抗氧化机制提供基础,为相关产品的开发应用提供一定的指导。实验通过液相-质谱/质谱(LC-MS/MS)联用对PSPE内的各项活性成分进行定性定量分析,并以不同浓度(黑腹果蝇0、0.5、2.0、5.0mg/mL;秀丽隐杆线虫0、70、140、280μg/mL)的PSPE饲喂模式生物。在黑腹果蝇实验中,分别从寿命、爬行能力、抗氧化酶活力以及抗氧化相关基因mRNA表达量等方面来研究PSPE的抗氧化作用;并且进一步建立高脂、紫外等损伤模型来研究紫薯提取物对果蝇的保护作用;最后通过双氧水和百草枯急性给毒来研究PSPE对果蝇的急性应激耐受能力的影响。在秀丽隐杆线虫实验中,研究PSPE对线虫寿命、急性氧化应激、抗氧化酶活力以及相关基因表达水平的影响。果蝇实验中发现,PSPE能够明显延长果蝇的生存时间,提高爬行能力,增强抗氧化酶活力、抑制脂质过氧化产物的积累以及上调相关抗衰老基因的表达水平。在高脂损伤和紫外线损伤的病理性果蝇衰老实验中发现,给予PSPE干预后对果蝇的氧化损伤具有一定的抑制作用。利用果蝇生存时间和相关生化指标测定来研究紫薯提取物对氧化损伤的拮抗作用。通过双氧水和百草枯急性氧化损伤实验得到PSPE亦能延缓果蝇的衰老,说明PSPE对急性损伤组果蝇具有一定的保护作用。线虫实验中发现,PSPE能明显抑制线虫的衰老,增加体内抗氧化酶活力以及上调相关抗衰老基因的表达水平。在热应激、紫外辐射应激、双氧水氧化应激、胡桃醌氧化应激及百草枯急性氧化应激实验中寿命均有效延长,荧光显微镜观察发现PSPE干预后线虫体内脂褐素自发荧光得到了减弱,并且与PSPE浓度呈一定剂量依赖效应。研究结果表明,PSPE能够显著影响实验模式生物体的平均寿命,调节体内内源性抗氧化基因mRNA的表达水平,增强抗氧化酶的活力,抑制过氧化产物的累积,提高模式生物清除体内自由基的能力,改善抗氧化能力,因此在本实验中证明PSPE具有良好的抗氧化以及延缓衰老的作用。
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