CPPU对山葡萄(Vitis amurensis Rupr.)雄花性别转换机理的研究

来源 :中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xinshouji1
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本论文以山葡萄雄株为试材,采用CPPU处理成功诱导了雄株花朵性反转,并通过对配子体发生、结实状况、花粉萌发率、内源激素水平、差异蛋白质组学等几方面的观察与研究,揭示了山葡萄雄株花朵性别转换与各因素间的内在联系。结果表明:1.花前15d(花序分离前期)是山葡萄雄株性别转换的最佳处理时期,100mg·L-1CPPU为最佳处理浓度。CPPU处理降低了山葡萄雄株花朵的花粉萌发率。2.处理和对照雄花的雌配子体在大孢子母细胞形成之前差异不明显;处理8d后对照与处理花朵的雌蕊中分别形成单核胚囊和二核胚囊;之后,处理雄株花朵胚囊中的雌配子分裂正常,并最终形成成熟的八核胚囊,而对照雄株花朵雌配子分裂异常,出现三核胚囊,之后胚囊发育停滞,并逐渐萎缩解体。3.内源激素水平的变化早于形态结构的变化,在雄花性别转换过程中起着关键的作用。CPPU处理后雄株花朵中的4种内源激素含量和平衡关系表现出不同的变化趋势,CPPU可能是通过调节花蕾内源激素在不同时期的水平及其平衡关系进而调控雌雄蕊的发育进程,最终实现山葡萄雄株性反转的诱导。4.建立了适用于山葡萄花蕾蛋白质分析的最佳双向电泳技术体系,即采用酚提取法提取山葡萄花蕾蛋白质,用裂解液Ⅱ裂解后水化上样,选用17cm、pH4-7的IPG胶条分离,在适宜的双向电泳条件下分离后,可以获得蛋白点丰富、背景清晰、分辨率高、重复性好的双向电泳图谱。5.运用差异蛋白质组学研究方法,得到了山葡萄雄株性别转换的关键蛋白质,即腺嘌呤磷酸核糖基转移酶3。此外,泛素-蛋白酶体降解途径、细胞结构以及膜融合、囊泡运输相关的蛋白、活性氧清除机制相关蛋白、光合作用相关蛋白与次级代谢相关蛋白均直接或间接参与花器官的生长发育。
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