rhbFGF-明胶海绵复合物促进兔腱-骨愈合的实验研究

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目的和意义: 前交叉韧带(ACL)损伤是运动中最常见的损伤。前交叉韧带损伤易引起膝关节不稳,会损伤关节软骨面、加重关节软骨退变,易导致创伤性关节炎。前交叉韧带损伤目前常用白体移植物重建以恢复膝关节稳定性。腱-骨愈合足前交叉韧带重建后的丰要关注点,加快腱-骨愈合,对于术后尽早进行膝关节的康复锻炼具有重要意义,进而可最大限度地恢复膝关节的功能。自体肌腱前交叉韧带重建后腱-骨愈合类型未有定论,移植肌腱在骨隧道的愈合过程中,其愈合类型、促进愈合的方法和影响愈合的因素都值得进一步研究。重建的效果固然与手术技术关系密切,但不能忽视影响腱-骨愈合的因素。但可以明确的足,纤维软骨带作为腱-骨结合部位特征性的结构,它的重建与修复对于腱-骨结合部位的愈合起到关键性的作用。碱性成纤维细胞牛长因子(bFGF)为腱-骨愈合时可检测到的生长因子之一,是关节软骨细胞行使合成和分解代谢功能的双重调节因子,其结果取决于的剂量和软骨细胞的成熟程度,在软骨的损伤和修复中起着重要的作用。本实验研究的目的在于研究碱性成纤维细胞生长因子促进腱-骨连接界面形成及纤维软骨带的生长,从而促进腱-骨愈合的效应,同时探讨移植肌腱在骨隧道内的愈合过程,阐明腱-骨愈合的组织学改变,为临床应用提供理论依据。 材料与方法: 实验动物选用成熟2.5-3.2 kg新西兰大白兔15只。用可吸收明胶海绵吸附碱性成纤维细胞生长因子溶液,冻干密封、4℃下保存。重建前交叉韧带方式模仿临床术式,先行切取同侧后肢踝关节处的趾长屈肌肌腱作为重建前交叉韧带移植物,用3-0 PROLENE不可吸收缝线在两端编织缝合,重建方式模拟临床:胫骨端肌腱采用不可吸收挤压螺钉固定,股骨端肌腱采用悬吊固定。右侧膝关节作为实验侧,在股骨隧道远关节腔部分的隧道内填允rhbFGF-明胶海绵复合物;左侧作为对照侧,只做单纯重建手术。分别于术后2、4、8、12周取材做大体观察、组织学、组织化学检查,8周时问点牛物力学检查。所得实验数据进行统计分析。 结果: 术后2周实验侧腱-骨界面结合比较紧密,纤维组织较多,Masson染色可见有Sharpey纤维牛成;术后4周可见大量成纤维细胞和新骨形成,腱一骨界面间隙消失;术后8周Sharpey纤维集结成束,新牛骨和肌腱与骨隧道连接紧密,无间隙,腱-骨间的分界消失。新生骨最多,新牛骨排列比较规则、整齐,但末见明显“潮线”牛成;术后12周可观察到有规律性的波浪起伏的“潮线”形成,基本上与正常的末端结构相同,可以看到明显的骨质部分向肌腱方向的推进趋势。 而在对照侧术后2周时,腱-骨界面愈合分离明显、边界清楚,新生纤维组织较少,4周时界面分离仍明显,8周才出现Sharpey纤维,12周时才出现Sharpey纤维密集排列有序成束,虽然出现类似腱-骨末端结构,但发育未完全,未见规律性“潮线”形成。 生物力学测试发现,术后8周时间点,实验侧抗拉脱强度大于对照侧,经过配对t检验两组间差异有统计学意义(P<0.01)。 结论: rhbFGF-明胶海绵复合物能诱导腱-骨愈合界面形成类似于正常前交叉韧带止点的直接连接,通过促进软骨化骨形成新生骨长入移植肌腱,促进腱骨愈合、增强愈合强度。
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