不同铂类对CNE-2细胞株放射增敏的体外比较实验研究

来源 :泸州医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:laowu000001
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目的:应用细胞克隆形成法,初步比较不同铂类顺铂、卡铂、奥沙利铂、奈达铂对人鼻咽癌低分化细胞株CNE-2的放射增敏效果以及其差异性。方法:培养鼻咽癌低分化细胞株CNE-2。将指数生长期的细胞按5×103个/孔细胞密度接种到96孔板,用WST-1法进行顺铂、卡铂、奥沙利铂、奈达铂的细胞毒性检测,计算得出各自IC10、IC50值。将IC10作为放射增敏的工作浓度。培养CNE-2细胞至指数生长期,并进行消化、重悬、计数,根据不同的射线剂量梯度,在培养皿中加入相应的细胞总数细胞悬液。实验分为正常对照组、单纯照射组、单纯药物组、药物+照射组,其中药物+照射组分为四个亚组:顺铂+照射组、卡铂+照射组、奥沙利铂+照射组、奈达铂+照射组。每组设三个培养皿。在射线照射前1天分别加入工作浓度IC10的顺铂、卡铂、奥沙利铂、奈达铂,各组分别给予0、0.5、1、2、3、4、6、8、10Gy照射剂量梯度照射。采用医用直线加速器,照射条件为6MV X线照射,剂量率为:412.31cGy/min,SSD为100cm,PDD为97.232%,照射野大小为30×30cm。接受照射后4小时,弃去原培养基,加入等量新的培养基在37℃、0.5%CO2恒温孵育箱中培养14d,记录不同处理对CNE-2细胞的杀伤作用,应用计数克隆形成方法,计算细胞存活分数,克隆形成率,应用单击多靶数学模型进行曲线拟合作图(GraphPad Prism5.0软件)。计算N、D0、Dq、SERD0、SERDq、SERSF2,比较单纯照射组和药物+照射组之间,以及各个药物+照射亚组之间的放射增敏作用的强弱。结果:顺铂、卡铂、奥沙利铂、奈达铂对CNE-2细胞的IC50分别为0.28ug/ml、1.43ug/ml、18.78ug/ml;IC10分别为1.94ug/ml、7.906ug/ml、1.486ug/ml、1.3833ug/ml。CNE-2细胞的克隆形成率为72%。单纯照射组的N值为2.305,D0值为1.478Gy,Dq值为1.234Gy;顺铂+照射组的N值为2.547,D0值为1.011Gy, Dq值为0.945Gy,SERD0、SERDq、SERSF2分别为1.462、1.306、1.579;卡铂+照射组的N值为2.263,D0值0.994Gy, Dq值为0.812Gy,SERD0、SERDq、SERSF2分别为1.487、1.521、1.796;奥沙利铂+照射组的N值为2.257,D0值为0.969Gy,Dq值为0.789Gy,SERD0、SERDq、SERSF2分别为1.524、1.563、1.884;奈达铂+照射组的N值为2.098,D0值为0.954Gy,Dq值为0.707Gy,SERD0、SERDq、SERSF2分别为1.549、1.746、2.070。结论:研究结果显示,顺铂、卡铂、奥沙利铂、奈达铂在IC10低浓度下对鼻咽癌CNE-2细胞株均具有放射增敏作用。放射增敏由强到弱为奈达铂,奥沙利铂,卡铂,顺铂。
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