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目的:通过研究观察趋化因子受体7(CXCR7)在口腔鳞癌中的表达,探讨其与趋化因子12(CXCL12)所组成的生物轴对口腔鳞癌的侵袭转移能力的影响,并探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对该生物轴的调控作用。 方法:1、Western blot法检测不同浓度CXCL12作用下CXCR7在Tca-8113中的表达。2、选择表达CXCR7最高的CXCL12浓度进行细胞培养,实验分组:低氧组+CXCL12组[H(C+)]、常氧+CXCL12组[N(C+)]、低氧CXCL12(-)组[H(C-)]和常氧CXCL12(-)组[N(C-)],采用Transwell侵袭法、粘附试验、划痕试验,观察四种培养条件下,缺氧和CXCL12对CXCR7的表达影响和Tca-8113细胞生物学行为的影响。3、Western blot法和免疫细胞化学法检测HIF-1α、CXCR7及生物轴下游靶基因MMP-9蛋白表达。并探讨CXCR7和HIF-1α的表达之间的相关性。 结果:1、检测常氧条件下CXCR7表达最高的CXCL12浓度:常氧培养Tca-8113细胞,按照0、20、30、40、50、60、80ng/ml浓度的细胞因子稀释液3ml/瓶加入培养瓶中进行CXCR7蛋白表达的筛选,结果发现CXCR7在50ng/ml时蛋白表达是最高的。2、Tca-8113细胞H(C+)、N(C+)、H(C-)、N(C-)四组的粘附能力:H(C+)组细胞A595值分别为(0.76±0.08)明显高于N(C-)组(0.21±0.03),N(C+)组(0.49±0.05)高于N(C-)组(0.21±0.03),差异有统计学意义(P<0.05)。3、Tca-8113细胞H(C+)、N(C+)、H(C-)、N(C-)四组24h,36h的迁移率H(C+)组为(0.532±0.268)%、(0.722±0.314)%,明显高于N(C-)组(0.404±0.684)%、(0.644±0.415)%。N(C+)组(0.483±0.513)%、(0.699±0.059)%高于N(C-)组(0.404±0.684)%、(0.644±0.415)%,差异有统计学意义(P<0.05)。4、Tca-8113细胞H(C+)、N(C+)、H(C-)、N(C-)四组的侵袭能力:H(C+)组穿膜细胞数为(145±16.7)个,明显高于N(C-)组(91.2±4.55)。N(C+)组穿膜细胞数为(113±6.04),高于N(C-)组(91.2±4.55),差异有统计学意义(P<0.05)。5、Western blot法检测H(C+)、N(C+)、H(C-)、N(C-)组CXCR7、HIF-1α及MMP9蛋白的变化,结果显示H(C+)组的CXCR7、HIF-1α及MMP-9表达最高。N(C+)组的CXCR7、及MMP-9表达明显高于N(C-)组。6、免疫细胞化学S-P法观察H(C+)、N(C+)、H(C-)、N(C-)的CXCR7、HIF-1α及MMP9表达变化,结果显示H(C+)组的CXCR7、HIF-1α及MMP9表达最高,N(C+)组的CXCR7、及MMP-9表达明显高于N(C-)组(图5)。 结论:1、在一定浓度下,CXCL12诱导调控其受体CXCR7的表达,二者呈正相关。2、HIF-1α可能通过调控CXCL12/CXCR7生物轴及其靶基因MMP-9表达促进Tca-8113细胞的侵袭迁移能力。