目的：
　　前列腺癌是男性生殖系统最常见的恶性肿瘤，也是肿瘤致死的第二大原因。机体铁含量增加在前列腺癌的生长、血管发生和转移中起着重要的作用，减少细胞内铁含量可明显抑制前列腺肿瘤进展。研究发现FGFR1信号异常与前列腺肿瘤发生发展密切相关，FGFR1信号分子可否通过调节铁代谢影响前列腺肿瘤进展仍鲜有研究。本课题将深入研究FGFR1与前列腺肿瘤细胞铁代谢之间的相互关系，探讨铁螯合剂协同FGFR1信号抑制对前列腺肿瘤细胞生长的影响，为前列腺肿瘤的治疗提供新的方向。
　　方法：
　　1.利用普鲁士蓝染色法对人前列腺癌切片进行组织内铁染色，分析铁含量与前列腺癌恶性程度的关系；对人高分化以及低分化前列腺癌的FGFR1和转铁蛋白1（TFR1）进行免疫组织化学染色，分析人前列腺癌中FGFR1与铁水平的相关性；利用Western blotting检测人前列腺肿瘤细胞DU145和LNCaP中铁代谢相关蛋白的表达及细胞内铁储量；同时检测分析FGFR抑制后对DU145细胞铁代谢的影响，深入分析前列腺癌中FGFR1与铁代谢的相关性。
　　2.利用CRISPR/Cas9系统敲除前列腺肿瘤细胞DU145中的FGFR1基因，比较敲除前后对细胞构成的影响；利用q-PCR及Western blotting技术检测DU145细胞FGFR1敲除前后铁代谢相关蛋白TFR1、FPN、Hepcidin等的表达，分析FGFR1敲除对铁代谢的影响；利用铁水平检测试剂盒检测FGFR1敲除前后DU145细胞内铁含量变化，进一步分析FGFR1敲除对铁代谢的影响。
　　3.免疫荧光法检测FGFR1敲除前后DU145细胞内活性氧水平，相应试剂盒检测细胞内谷胱甘肽氧化酶、GPXS和MDA表达，QPCR以及Western blotting技术检测脂质过氧化相关指标SOD-2和GPX4表达，分析FGFR1敲除对DU145细胞氧化应激及脂质过氧化的影响；利用WB和ELISA法检测炎症刺激因子IL-6的表达情况，探讨FGFR1敲除对DU145细胞炎症信号的影响。
　　4.细胞给予铁螯合剂去铁胺处理后，利用普鲁士蓝染色法进行细胞内铁染色，分析加入DFO后对FGFR1敲除前后DU145细胞中铁含量的影响；利用Western blotting技术检测铁代谢相关指标的变化，利用BrdU荧光检测FGFR1敲除之后以及给予去铁胺处理后DU145细胞生长的变化，进一步分析铁螯合剂和FGFR1缺失的协同作用对细胞铁载量及增殖凋亡的影响。
　　结果：
　　1.前列腺癌恶性程度越高，铁的含量也随之升高；FGFR1表达与转铁蛋白TFR1的表达呈正相关；与FGFR1高表达DU145细胞相比，FGFR1低表达的LNCaP细胞中，转铁蛋白TFR1表达降低，铁输出蛋白FPN升高；抑制FGFR1也能明显改变FGF2刺激的铁代谢蛋白及信号通路变化，结果表明前列腺肿瘤FGFR1表达与铁储量及肿瘤进展密切相关。
　　2.免疫荧光结果显示FGFR1敲除显著增加DU145细胞E-cadherin表达，且明显降低细胞内铁含量；QPCR以及Western blotting结果均显示，与对照组相比，FGFR1敲除使铁代谢调节蛋白TFR1、DMT1、FTH1、Hepcidin表达降低，FPN表达升高，结果表明FGFR1敲除可通过调节铁代谢相关蛋白变化明显减低胞内铁含量从而影响DU145细胞表型。
　　3.DHE染色显示FGFR1敲除后，DU145细胞活性氧含量明显降低；与对照组相比，FGFR1敲除后DU145细胞中GPX4在转录水平及胞外分泌量均升高、胞内谷胱甘肽升高、细胞生成MDA含量降低；此外，FGFR1敲除明显抑制炎症因子IL-6蛋白表达及分泌，结果表明FGFR1敲除可改变DU145细胞内脂质过氧化水平及细胞炎症信号。
　　4.细胞增殖研究发现铁螯合剂能明显抑制DU145细胞生长，在FGFR1敲除细胞中抑制效果更为明显；同时铁螯合剂也通过影响铁蛋白转运促进DU145细胞凋亡增加，普鲁士蓝染色表明铁螯合剂FGFR1敲除协同降低DU145胞内铁载量；BrdU免疫荧光染色也显示FGFR1敲除减少DU145细胞增殖，加入铁螯合剂后抑制作用更为明显，结果表明铁螯合剂协同FGFR1敲除可显著降低DU145胞内铁含量来抑制前列腺肿瘤细胞的生长。
　　结论：
　　FGFR1异常表达通过调节铁转运影响胞内铁载量而影响前列腺肿瘤进展，FGFR1敲除能显著降低胞内铁含量及氧化应激与炎症信号，铁螯合剂协同促进FGFR1敲除所引起的肿瘤细胞抑制作用。