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分别于2008年8月、10月,2009年1月、3月,在广东省湛江市麻章区湖光镇,对广益福园艺和兰盈富贵竹场进行的4批次调查,结果表明,两个富贵竹厂主要发生以下四种病害:(1)由黑曲霉(Aspergillus niger V.Tiegh)引起的黑腐病,(2)由拟黑根霉菌(Thielaviopsis sp.)引起的湿腐病,(3)由青霉(Penicillium sp.)引起的青霉病,(4)由刺孢盘菌(colletotrichum sp.)引起的炭疽病。以上四种病害,主要集中在高温高湿的8月发病,其总发病率达到33.3%,以低温干燥的1月发病较轻,其总发病率在5.0%左右。
拮抗菌H5是从湛江红树林植物红海榄根部分离得到的一株对富贵竹采后主要病害之一的黑腐病病原菌具有强拮抗作用的菌株。为了进一下评价和开发该菌株在富贵竹采后病害和其它主要作物病害生物防治的应用潜力,本文采用平板对峙法和管碟法,对拮抗菌H5的抗菌谱进行了测定。
结合Biolog细菌自动鉴定系统、16SrDNA序列分析、生理生化对比实验对拮抗菌H5进行了鉴定,最终将拮抗菌H5鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)。
拮抗菌H5抑菌活性传代稳定性结果表明,以富贵竹黑腐病病菌为指示菌,连续传代6次,其抑菌效果不变,从第7代开始略有下降,至第10代其抑菌直径比原出发菌株减少了1.7mm,活性下降8.5%。
定殖试验结果表明,拮抗菌H5采用喷雾法接种于富贵竹竹段表面,在第1~28天,菌量定殖数量基本稳定,在1.2~2.5×106cfu/cm2。通过H5发酵原液浸泡富贵竹下端切口的接种方式,菌体未能通过富贵竹下端切口进入富贵竹体内。
经试验,结果表明,拮抗菌H5的发酵液喷雾富贵竹表面和浸泡富贵竹上端切口的处理方法均对富贵竹的上端切口修口效果、顶侧芽和根的生长都没有负面的影响,可直接应用于实际生产实践中。其中,H5发酵液喷雾和浸泡处理均对富贵竹竹段顶侧芽的生长有促生作用,其促生效果分别为22.2%和16.7%。
在防治富贵竹黑腐病的试验中,利用拮抗菌H5发酵原液、除菌滤液、菌体悬浮液对富贵竹竹段进行喷雾处理的防治效果如下,第7天的防治效果分别为65.6%、50.3%和61.3%;第14天的防治效果分别为38.7%、10.3%和27.0%。第21天和28天的防治效果变化不大,第28天的防治效果分别为41.3%、37.8%和12.7%。H5发酵原液、除菌滤液、菌体悬浮液浸泡富贵竹上端切口第7天的防治效果分别为93.7%、79.4%和58.7%。第14天,21天和28天的防治效果不变,其防治效果分别为66.7%、42.9%和0。