大叶冬青(Ilex latifolia Thunb.)为冬青科(Aquifoliaceae)冬青属(Ilex)植物,以干燥叶入药,性平味苦,具有清热解暑的功效。大叶冬青主要含有三萜皂苷类、多酚类、多糖类和挥发油类等化学成分,具有降血压、降血脂和抗菌消炎等药理作用,临床上用于治疗高血压、高血脂和高血糖等疾病。本课题对大叶冬青的化学成分、各组分的抗氧化活性、谱效关系以及皂苷类化合物与黄嘌呤氧化酶的构效关系进行了研究,为大叶冬青药效物质和质量控制提供了基础与依据。本文综合运用现代色谱分离技术,从大叶冬青70%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到化合物17种,鉴定结构13种,分别是:羽扇豆醇、熊果酸、β-谷甾醇、表没食子儿茶素没食子酸酯、苦丁冬青皂苷A、大叶冬青皂苷A、大叶冬青皂苷D、苦丁冬青皂苷D、苦丁冬青皂苷F、3,9-二[2,4-二叔丁基-苯氧基]-2,4,8,10-四氧杂-3,9-二磷杂螺[5.5]-十一烷、阿魏酸、大叶冬青皂苷B、大叶冬青皂苷G。其中,化合物10为首次从该属植物中分离得到。本文通过Folin-Ciocalteu比色法、香草醛-冰醋酸法、亚硝酸钠法、苯酚-硫酸法对大叶冬青各组分进行总多酚、总皂苷、总黄酮、总多糖的含量测定。采用DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和总还原力3种方法评价大叶冬青各组分的体外抗氧化活性。大叶冬青乙酸乙酯萃取部位中总多酚含量最高,正丁醇萃取部位中总黄酮、总皂苷含量最高,水萃取部位中总多糖含量最高。大叶冬青乙酸乙酯萃取部位的体外抗氧化活性能力最好。本文采用HPLC法测定了10批次不同产地的大叶冬青药材样品,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版评价并建立共有模式,并进行主成分分析。采用HPLC法建立酶-底物反应体系,对不同批次的大叶冬青药材的黄嘌呤氧化酶抑制活性进行研究,采用SPSS软件对数据进行相关性分析。采用氧嗪酸钾诱导建立小鼠高尿酸血症模型,检测小鼠血清中UC、XOD水平以及肝组织中XOD水平变化。结果显示,10批次不同产地的大叶冬青药材HPLC指纹图谱中共有15个特征峰,其中峰11(苦丁茶冬青皂苷E)、14(苦丁冬青皂苷F)与黄嘌呤氧化酶抑制作用呈中等程度相关,峰5、6(山奈酚-3-O-β-D-芸香糖苷)、7(7-异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷)、10(大叶冬青皂苷C)、13(大叶冬青皂苷D)相关性最强。由主成分分析可知,峰9(大叶冬青皂苷H)在大叶冬青药材质量控制中起到至关重要的作用。氧嗪酸钾致小鼠高尿酸血症模型实验结果表明,大叶冬青提取物高、中、低剂量组均能显著降低小鼠血清UC水平,抑制肝组织中XOD活性,并呈现一定的量效关系。本文采用荧光光谱法、圆二色谱法、紫外分光光度法对大叶冬青中2种皂苷类化合物与XO的相互作用进行研究。Latifolosides A、Latifolosides D、Kudinsoide A和Kudinsoide F均能对XO的内源荧光产生猝灭作用,并且对其周围氨基酸残基的极性环境未造成影响。其中,Latifolosides A和Latifolosides D对XO的淬灭作用是以静态猝灭为主的联合猝灭,Kudinsoide A和Kudinsoide F对XO的猝灭作用主要是静态猝灭,4种化合物与XO之间均形成1个结合位点。对比热力学方程结果,Latifolosides A和Latifolosides D与XO的相互作用过程为熵驱动的吸热反应,主要作用力为疏水作用力,Kudinsoide A和Kudinsoide F与XO的相互作用过程为焓驱动的放热反应,主要作用力为氢键和范德华力。推测苦丁冬青皂苷结构中含有较多活泼羟基,与XO的结合能力要强于大叶冬青皂苷,对XO构象的影响也更大。与XO的结合能力要强于大叶冬青皂苷,对XO构象的影响也更大。