蛋氨酸源对肉鸡脂质代谢影响及机理研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:skiau2548
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本研究通过3个试验探讨了蛋氨酸来源和水平对不同阶段肉鸡脂质代谢的影响和可能的分子机制,同时对肉鸡不同阶段蛋氨酸的生物学效价做出评定。试验一不同来源蛋氨酸在肉鸡不同阶段的生物学效价及其对肉鸡肝脏和抗氧化的影响本试验旨在比较肉鸡不同阶段不同蛋氨酸的相对生物学效价,初步探索不同来源和水平蛋氨酸对肉鸡肝脏和氧化应激的影响。试验采用3×5+1完全随机试验设计,3种蛋氨酸来源分别是L-蛋氨酸(LM)、DL-蛋氨酸(DLM)和蛋氨酸羟基类似物钙盐(MHA-Ca),5个蛋氨酸添加水平分别是0.03、0.06、0.10、0.15和0.21%,设置一个不添加蛋氨酸组作为负对照,共16个处理,每个处理8个重复,每个重复20只鸡。试验期为10-42d。结果显示:蛋氨酸来源对生长性能没有显著影响(P>0.05),而LM和DLM22-42d和10-42d饲料转化率FCR显著高于MHA-Ca(P=0.015和P=0.017)且来源和水平存在显著的交互作用(P=0.011),在缺乏的饲粮中添加三种蛋氨酸均能显著增加各阶段的生长性能(P<0.05)。蛋氨酸来源显著影响半净膛率,对其他屠体性能指标均无显著影响;而蛋氨酸水平极显著提高屠体重、全净膛重/率、半净膛重、胸肌重/率、腿肌重肝脏重(P<0.01),显著提高腿重、半净膛率(P<0.05),显著降低腿肌率,对屠宰率和肝脏指数无显著影响。在等摩尔添加的基础上,以前期(10-21d)、后期(22-42d)和全期(10-42d)生长性能为评定标准,DLM相对于LM的生物学效价分别为99.2%、148.1%和132.2%,MHA-Ca的相对生物学效价为82.0%、79.1%和84.8%;以屠体性能为评定指标DLM相对于LM的生物学效价为112.4%,MHA-Ca相对于LM的生物学效价为78.7%。对机体氧化应激状态的影响,实验结果显示与LM相比,DLM和MHA-Ca显著提高肉鸡42d肝脏的过氧化氢(H2O2)含量(P<0.0001),显著增加肝脏过氧化氢酶(CAT)的活性(P=0.001),同时显著降低肝脏丙二醛(MDA)的含量(P<0.0001)。与对照组相比,添加蛋氨酸能增加肉鸡42d肝脏H2O2含量和降低MDA含量。而从氧化还原状态来看,LM和DLM组肉鸡42d肝脏总谷胱甘肽T-GSH显著高于MHA-Ca(P=0.001),DLM组还原型谷胱甘肽reGSH含量显著高于MHA-Ca(P=0.005),蛋氨酸水平显著提高三种GSH的含量(P<0.0001)。蛋氨酸来源和水平对reGSH占TGSH的比例及其占GSSG的比例无显著影响(P=0.221,P=0.304和P=0.408,P=0226)。对DNA氧化损伤的测定结果显示,蛋氨酸来源对42d肉鸡肝脏8羟基鸟苷(8-OHDG)的含量有显著的影响(P=0.002),随添加水平的升高,肝脏8-OHDG含量显著降低,且二者存在显著的交互效应(P=0.003)。结论:在蛋氨酸缺乏饲粮中添加LM、DLM和MHA-Ca均能显著改善肉鸡生长性能和屠体性能,但三种蛋氨酸之间无显著差异,10-21d肉鸡饲粮适宜水平为:LM0.12%,DLM0.15%,MHA-Ca0.15%。蛋氨酸来源对抗氧化体系的影响没有生理相关性差异,但与蛋氨酸缺乏组相比添加蛋氨酸能显著改善鸡只的抗氧化状态。试验二不同蛋氨酸源对前期(1-21d)肉鸡脂质代谢的影响及其机理本试验旨在研究不同蛋氨酸来源和水平对前期(1-21d)肉鸡脂质代谢的影响机制。试验前期(1-21d)采用3×3+1随机试验设计,3种蛋氨酸来源(LM、DLM和MHA-Ca),4个蛋氨酸添加水平(0.10、0.22和0.32),设置一个不添加蛋氨酸的处理组作为负对照组,共计11个处理。试验期1-21d。结果显示:蛋氨酸来源对肉鸡14d平均体重(BW)、1-14d平均日增重(ADG)、1-7dADFI、1-21dADFI有显著影响(P=0.049、P=0.029、P=0.015和P=0.021),LM均显著高于MHA-Ca;蛋氨酸水平显著增加1-21d生长性能(P<0.05)。添加三种蛋氨酸均显著降低21d肝脏粗脂肪含量,但三种蛋氨酸之间无显著差异;随着蛋氨酸添加水平的增加21d肝脏粗脂肪含量逐渐降低并在0.32%添加水平处达到差异显著(P=0.027)。DLM组21d血清TG含量显著高于LM和MHA-Ca(P=0.005),随蛋氨酸添加水平的增加LDLC呈线性增加(P<0.0001)。添加LM组21d肝脏MDA显著低于DLM和MHA-Ca组(P=0.005),添加三种蛋氨酸均一定程度增加肉鸡21d血浆Hcy含量,其中MHA-Ca组显著高于LM(P=0.002)。随着蛋氨酸添加水平增加,肝脏H2O2含量先降低后升高但均低于负对照组。对肉鸡脂质代谢相关基因表达量影响的结果为MHA-Ca组14d肝脏ApoB和Cpt1a相对表达量显著高于LM和DLM(P<0.0001和P=0.010),DLM组Chrebp表达量低于LM和MHA-Ca(P=0.007);蛋氨酸水平显著降低肉鸡肝脏14d Adipor2、ACOX1、FASN和21d ACOX1、Cpt1a相对表达量,显著上调14d ApoB和21d Chrebp;对Hcy代谢关键酶mRNA表达量影响的结果为LM和DLM组14d肝脏SAHH和甜菜碱-同型半胱氨酸甲基转移酶BHMT表达量显著低于MHA-Ca组(P<0.05),三种蛋氨酸的14d CβS mRNA表达量均差异显著,以LM最低MHA-Ca表达量最高,LM 21d BHMT mRNA的相对表达量显著高于DLM和MHA-Ca,而CβS则是LM和DLM均显著高于MHA-Ca,添加DLM和MHA-Ca均能显著上调肝脏CβS mRNA。对肝脏细胞炎症因子的影响为DLM和MHA-Ca 14d肝脏IL8相对表达量显著低于LM,LM和DLM组21d白介素1 IL1β和IL8表达量均显著高于MHA-Ca(P<0.05)。结论:在蛋氨酸缺乏饲粮上分别添加三种来源的蛋氨酸:LM、DLM和MHA-Ca均能显著增加肉鸡前期生长性能,且添加LM组1-21dADFI高于DLM和MHA-Ca,添加0.10%-0.32%的LM、DLM或MHA-Ca都能降低肉鸡21d肝脏脂肪的沉积。蛋氨酸来源和水平主要通过抑制脂质分解和转运来增加肝脏脂肪沉积,而Hcy介导的血管内皮损伤引起的肝脏脂肪堆积作用起辅助作用。试验三不同蛋氨酸源对后期(22-42d)肉鸡脂质代谢的影响及其机理本试验旨在研究不同蛋氨酸源对后期(22-42d)肉鸡脂质代谢的影响及其分子作用机制,并对后期肉鸡蛋氨酸效价做出评估。试验前期设置饲喂蛋氨酸缺乏饲粮,其他各组饲喂满足蛋氨酸需要量的DLM(DLM,0.22%;Met,0.50%)饲粮;后期采用3×4+1随机试验设计,3种蛋氨酸来源(LM、DLM和MHA-Ca),4个蛋氨酸添加水平(0.05、0.10、0.14和0.24),设计不添加蛋氨酸处理组作为负对照组,共计13个处理。试验前期各处理饲喂满足蛋氨酸需要量的饲粮,对照组饲喂基础饲粮。试验期22-42d。结果显示:LM和DLM组22-42d平均日采食量ADFI(P=0.002)显著高于MHA-Ca而二者间差异不显著。蛋氨酸水平对22-42d生长性能均有极显著影响(P<0.0001)。蛋氨酸来源对屠体性能均无显著影响(P>0.05),42d屠体重、全净膛重、半净膛重、胸肌重、腿肌重和胸肌率均随三种蛋氨酸添加水平的增加而显著增加(P<0.05)。在等摩尔添加基础上,以生长性能为评定指标DLM相对于LM的生物学效价为100.1%,MHA-Ca为85.1%。DLM组肝脏绝对重和肝脏指数均高于LM和MHA-Ca(P=0.009和P=0.011);肝脏绝对重量和肝脏指数与三种蛋氨酸添加水平均存在显著线性和二次关系(P<0.05)。蛋氨酸来源对腹脂重和腹脂率均没有显著的影响,腹脂重与三种蛋氨酸添加水平均存在显著的二次关系;腹脂率与蛋氨酸添加水平存在着显著的线性关系。蛋氨酸来源和水平均显著影响42d肝脏的粗脂肪含量,且蛋氨酸来源与水平之间存在显著的交互作用(P=0.016,P=0.002和P=0.004)。以LM和DLM为蛋氨酸源时,蛋氨酸缺乏和过量都会增加肉鸡42d肝脏粗脂肪的含量;而以MHA-Ca为蛋氨酸源时,添加蛋氨酸可以降低肉鸡42d肝脏粗脂肪含量。蛋氨酸水平对低密度脂蛋白胆固醇LDLC有显著影响的趋势(P=0.051),LDLC与三种蛋氨酸添加水平均存在着显著的线性关系(P<0.0001)。LM组血浆同型半胱氨酸Hcy显著低于DLM和MHA-Ca(P<0.001)。蛋氨酸来源对肉鸡42d肝脏丙二醛(MDA,malondialdehyde)和过氧化氢(H2O2)均有显著的影响(P<0.05),蛋氨酸添加水平显著增加血清H2O2。42d肝脏MDA和H2O2与蛋氨酸添加水平呈显著的线性和二次关系(P<0.05)。MHA-Ca显著降低肝脏肉毒碱棕榈酰转移酶1a Cpt1a表达量(P=0.009),LM显著增加42d肝脏脂肪酸合酶FASN和载脂蛋白B ApoB相对表达量(P=0.014和P=0.002);蛋氨酸水平显著降低脂联素受体2 Adipor2、脂酰辅酶A氧化酶1 ACOX1、Cpt1a、碳水化合物反应元件结合蛋白Chrebp、FASN和ApoB相对表达量(P<0.05)。DLM显著降低腺苷-S-同型半胱氨酸水解酶SAHH表达量(P=0.048),LM显著上调MS蛋氨酸合酶相对表达量(P<0.0001);蛋氨酸添加水平显著降低MS和升高胱硫醚β合酶CβS mRNA表达量(P<0.0001)。LM显著上调肉鸡42d肝脏肿瘤坏死因子αTNF-α的表达量(P=0.012),蛋氨酸添加水平显著降低血管细胞粘附因子VCAM1和TNF-α的表达水平(P<0.0001),而显著上调白介素8 IL-8的表达水平(P=0.022)。结论:在蛋氨酸缺乏饲粮上添加三种来源的蛋氨酸:LM、DLM和MHA-Ca均能显著增加肉鸡后期生长性能和屠体性能,但在前两周添加MHA-Ca组生长性能低于LM和DLM。在本试验添加水平范围内0.24%DLM显著降低22-42d肉鸡腹脂沉积;蛋氨酸缺乏以及后期添加过量的LM和DLM均会引起肝脏脂肪沉积增加,而添加各水平MHA-Ca均会降低肝脏脂肪沉积,蛋氨酸来源及水平主要可能通过调节脂质代谢关键酶和Hcy介导的脂质转运抑制来增加肝脏脂肪蓄积,但DLM和LM能调控脂质分解、合成和转运,而MHA-Ca主要抑制脂质转运。综上所述,(1)前期或后期的蛋氨酸缺乏都会显著抑制肉鸡的生长,在本试验添加水平范围内LM、DLM和MHA-Ca对肉鸡生长的影响未表现出显著差异。(2)前期或全期蛋氨酸缺乏均会增加肝脏脂肪沉积。蛋氨酸来源对生长后期肉鸡的腹脂沉积无显著影响;在蛋氨酸缺乏饲粮上添加三种蛋氨酸均能降低肉鸡腹脂率,添加0.24%DLM降低腹脂沉积的效果最好;在后期添加过量LM和DLM会引起肝脏脂肪沉积增加,而前期添加各水平LM和DLM均会降低肝脏粗脂肪的含量;但在前期和后期添加各水平的MHA-Ca均会降低肝脏粗脂肪沉积;(3)蛋氨酸来源和水平主要通过抑制脂质分解和转运来增加肝脏脂肪沉积,而Hcy介导的血管内皮损伤引起的肝脏脂肪堆积作用起辅助作用。LM和DLM主要通过调控脂质代谢关键酶和Hcy介导的脂质转运抑制来增加肝脏脂肪蓄积,但DLM和LM能调控脂质分解、合成和转运,而MHA-Ca主要抑制脂质转运。
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