胶原（Collagen）是细胞外基质的一种结构蛋白，其特殊的三螺旋结构赋予胶原良好的生物相容性、可降解性、低抗原性及止血性能等生物活性，已广泛应用于生物医学材料、组织工程、保健品、食品、化妆品等领域。鱼鳞是水产品加工的主要副产物之一，多被作为废弃物直接处理，既造成了严重的资源浪费，又给环境带来了极大的污染。本研究以罗非鱼（Tilapiamossambica）鱼鳞为原料，利用响应面法对鱼鳞的脱钙工艺进行优化；探讨低温生物酶解技术提取鱼鳞胶原的最佳工艺条件；并将提取的鱼鳞Ⅰ型胶原与壳聚糖共混交联，通过正交试验优化胶原-壳聚糖止血海绵的制备工艺，研制出止血海绵；同时，通过小鼠模型动物试验，探究其止血性能、致敏性与生物相容性。主要研究内容如下：1、经成分分析发现鱼鳞中的灰分含量达34.2%，钙含量高达15.8%，直接影响着鱼鳞胶原的提取效率，因此试验采用酸法对鱼鳞进行脱钙处理。以鱼鳞脱钙率为指标，以盐酸浓度、底物浓度、反应温度及反应时间为影响因子，进行单因素试验，筛选出适当的因素和水平，运用Box-Behnken响应面法，按照建立的动态方程模型，分析各因素的显著性和交互作用，得出罗非鱼鱼鳞脱钙的最佳工艺条件为：盐酸浓度2.9%，底物浓度6.3%，反应时间1.9h，该条件下鱼鳞脱钙率为99.55%。2、采用低温生物酶解技术从脱钙处理后的鱼鳞中提取Ⅰ型胶原。以鱼鳞胶原提取率为指标，选取底物浓度、加酶量、pH及提取时间为影响因子，进行单因素试验，筛选出适当的因素和水平，运用Box-Behnken响应面法，按照建立的动态方程模型，分析各因素的显著性和交互作用，得出罗非鱼鱼鳞胶原提取的最佳工艺条件为：底物浓度7.8%，加酶量43.4U/g，pH1.8，该条件下鱼鳞胶原提取率为17.41%。按照最优工艺条件，连续3次酶法提取鱼鳞胶原，总提取率为46.96%，经冷冻干燥后，鱼鳞胶原的总得率为12.21%。鱼鳞胶原通过SDS-PAGE凝胶电泳观察、氨基酸组成分析、紫外光谱扫描和傅里叶变换红外光谱检测等技术手段分析比较后，确认为典型的Ⅰ型胶原。3、将鱼鳞胶原与壳聚糖进行共混交联，制备胶原-壳聚糖止血海绵。通过单因素试验和正交试验的工艺优化，研究影响止血海绵特性的主要因素，获得最优制备工艺：胶原与壳聚糖比例7∶3，制备液总浓度1.4%，交联剂戊二醛浓度0.015%，在该条件下制成的胶原-壳聚糖止血海绵具有优良的止血性能且经扫描电镜观察，发现止血海绵具有蜂窝状多孔三维立体结构。4、通过小鼠股动脉止血试验证实了胶原-壳聚糖止血海绵的止血时间为（68±9）s，快于吸收性明胶海绵和医用脱脂棉，止血效果理想；经豚鼠背部健康皮肤和破损皮肤的单次接触试验表明该止血海绵对皮肤无致敏性、无刺激性，安全性强；在小鼠的肝脏相容性试验中证实该止血海绵在8周内可完全被小鼠肝脏吸附，生物相容性好。