目的：建立大鼠胫骨中段闭合折骨髓内克氏针固定骨折模型，观察活血化瘀汤对SD大鼠骨折愈合过程中局部转化生长因子β₁（transforming growth factor-β₁，TGF-β₁）mRNA、蛋白表达，及血清Ⅰ型胶原、骨钙素表达影响，石蜡切片、透射电镜、X光片、抗折力试验观察骨折愈合情况，探讨活血化瘀汤对大鼠骨折愈合过程中软骨内成骨机制的影响。方法：采用体重280±30g、雄性SD大鼠99只，建立大鼠胫骨中段闭合折骨髓内克氏针固定骨折模型，将84只造模成功大鼠随机分成活血化瘀汤组和生理盐水组，6只正常大鼠设为正常对照组，麻醉苏醒后开始分别灌服中药和生理盐水，正常对照组灌服生理盐水。于造模后3d、5d、7d、14d、21d、28d、35d时间点在麻醉下，腹主动脉取血，检测血清Ⅰ型胶原、骨钙素的表达：同时取骨折区组织行石蜡切片、透射电镜观察，应用RT-PCR（反转录-聚合酶链反应）、Elisa（酶联免疫吸附法）等技术检测TGF-β₁mRNA、蛋白的表达。结果：活血化瘀汤能促进骨折SD大鼠Ⅰ型胶原、骨钙素、TGF-β₁mRNA及蛋白的表达。SD大鼠血清Ⅰ型胶原3d时开始表达增强，7d时表达减弱，达到低谷（高于正常值），然后表达逐渐增强，21d时达到高峰，此后表达量逐渐降低，35d时，基本降至正常值范围：两组的表达趋势一致。而中药组表达量始终较对照组高，5d、7d、14d、21d差异非常显著（p＜0.01）；3d、28d、35d无显著性差异（p＞0.05），血清骨钙素的表达与Ⅰ型胶原的表达基本一致。SD大鼠骨痂TGF-β₁mRNA的表达3d时达到第一个峰值，随后表达量逐渐降低，7d时达到一个低谷，然后表达逐渐增强，14d时达到第二个峰值亦是表达最高点，随后表达逐渐减弱；28d以后未检测到TGF-β₁mRNA的表达，两组的表达趋势一致。5d、7d对照组较中药组表达增强，差异非常显著（p＜0.01）；3d、14d中药组较对照组表达增强，差异非常显著（p＜0.01）；21d中药组较对照组表达增强，差异显著（p＜0.05），TGF-β₁mRNA与蛋白的表达具有一致性。活血化瘀汤能缩短骨折愈合、塑形时间，提高骨折愈合质量。结论：1、大鼠胫骨中段闭合折骨髓内克氏针固定骨折模型稳定，可操作性强，重复性好。2、活血化瘀汤能通过促进骨折大鼠Ⅰ型胶原、骨钙素、TGF-β₁mRNA及蛋白的表达，促进软骨内成骨。3、活血化瘀汤能缩短骨折愈合、塑形时间，提高骨折愈合的质量。4、TGF-β₁是骨折愈合过程中软骨内成骨的标志性因子。5、在骨折早期中药组TGF-β₁mRNA及蛋白表达较对照组表达反而减少，其原因可能是：活血化瘀汤影响了Ⅰhh／甲状旁腺素相关肽信号系统、TGF-β／BMPs间的信号传导、TGF-β₁与其受体结合的数量。