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目的根据前期研究结果及文献复习，我们得出如下假设：1. CXCR4阳性牙髓细胞（CXC chemokine receptor4-positive dental pulp cells，CXCR4+DPCs）可能是牙髓在形成修复性牙本质过程中起重要作用的干/前体细胞；2.低氧诱导因子-1α（Hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α）可能是牙髓损伤后启动牙髓修复反应的重要启动因子；3.去铁胺（Deferoxamine, DFO）可能通过HIF-1α促进牙髓组织的修复能力。为验证上述假设，我们采用免疫磁珠筛选CXCR4+DPCs并进行鉴定，然后考察CXCR4+DPCs的细胞克隆形成能力及多向分化能力，从而证明CXCR4+DPCs具有干细胞的特性；采用DFO处理DPCs，观察其修复能力的变化，并结合RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术，探讨DFO通过HIF-1α调节修复性牙本质形成的分子机理。材料和方法1.采用免疫磁珠筛选CXCR4+DPCs并进行鉴定，然后考察CXCR4+DPCs的细胞克隆形成能力及多向分化能力。2.不同浓度DFO作用DPCs不同时间后，从对细胞活性、增殖及迁移等几个方面的影响挑选出DFO的最佳作用浓度及时间。3.以腺病毒作为载体，构建HIF-1α shRNA，转染DPCs，干扰HIF-1α基因的表达并进行验证。4.体外观察DFO作用HIF-1α基因沉默前/后DPCs成牙本质分化能力的变化。5.观察DFO预处理HIF-1α基因沉默前/后DPCs在体内形成牙本质样组织的情况。结果1．成功分离和鉴定CXCR4+DPCs，证实其具有增殖能力强及多向分化能力特点。2．10μM DFO处理DPCs48h，可促进其增殖和横向迁移，并能提高其HIF-1α的表达，但是对其细胞活性和趋化作用的影响不明显。3. HIF-1α干扰腺病毒（pAd/pENTR/shRNA-/GFP-HIF-1α）在mRNA水平的干扰效率为73.4%，并在蛋白水平成功阻断了DFO促进DPCs HIF-1α的表达效果。4.10μM DFO处理DPCs48h，可以在体外促进其成牙本质分化。几个与成牙本质分化相关的基因也被上调。沉默HIF-1α基因后，DFO成牙本质分化的促进作用即被消除。5.体内实验结果显示10μM DFO预处理DPCs48h后，可在体内形成更多的牙本质样组织，沉默HIF-1α基因后，DPCs几乎不能形成牙本质样组织。结论1.本研究中我们成功分离CXCR4+DPCs，并证实其具有DPSCs的特性。2. DFO处理DPCs的最佳作用浓度为10M，最佳处理时间为48h。3.成功构建HIF-1α干扰腺病毒（pAd/pENTR/shRNA-/GFP-HIF-1α）。4. DFO可以在体外和体内促进DPCs成牙本质分化。沉默HIF-1α基因后，DFO的促进作用即被消除。