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目的:研究脑内过表达的microRNA125b-5p对脑缺血再灌注损伤的保护作用以及可能的作用机制。方法:首先选用线栓法建立小鼠局灶性大脑中动脉栓塞模型(transient middle cerebral artery occlusion,tMCAO),采用 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride(TTC)染色法测定脑梗死体积,以mNSS评分、Corner test两个行为学实验进行神经功能评价。通过侧脑室定位注射(I.C.V)miR125b-5p的类似物(mimic)实现其过表达,研究其对脑缺血再灌注损伤的作用。同时为了模拟体内缺血再灌注损伤对小胶质细胞及神经元的影响,我们体外培养了小胶质BV2细胞和神经元HT-22细胞,建立体外缺糖缺氧(OGD)复氧模型。另外,我们还以脂多糖(LPS)和原代皮层神经元缺糖缺氧再复氧的上清刺激BV2细胞,诱导炎症反应,模拟缺血再灌注后小胶质细胞的炎症反应。同时为了模拟体内小胶质细胞和神经元的相互作用,我们在BV2细胞中过表达miR125b-5p后再以OGD处理,收集条件上清处理HT-22细胞,通过流式细胞仪检测HT-22细胞的凋亡。采用Real-time qPCR检测造模前后小鼠梗死部位和血浆、造模前后小胶质细胞中的miR125b-5p的表达;分别采用western blot、ELISA和Real-time qPCR检测小胶质细胞激活后炎症介质的表达。结果:和假手术组小鼠比较,在急性缺血再灌注小鼠的血浆和梗死皮层部位miR125b-5p表达显著下调;和阴性对照组相比,过表达miR125b-5p减少tMCAO模型后小鼠脑梗死体积,同时减轻造模后小鼠的神经功能缺失。另外,过表达miR125b-5p可降低脑梗死区iNOS、COX-2、TNF-α和IL-6的mRNA和蛋白表达水平。细胞实验结果表明,以LPS、OGD以及OGD条件上清激活的小胶质细胞,miR125b-5p表达均下降,而过表达miR125b-5p可以抑制上述三种不同刺激激活小胶质细胞导致的iNOS、COX-2、TNF-α和IL-6的mRNA和蛋白的表达。和正常培液或者未经OGD处理过的BV2细胞的上清条件上清相比,OGD后的BV2细胞条件上清导致HT-22细胞死亡;但是和转染阴性对照的BV2细胞OGD后收集的条件上清相比,转染miR125b-5p的BV2细胞OGD后的条件上清可以减少HT-22细胞死亡。数据库预测TNF-α为miR125b-5p潜在作用靶点,miR125b-5p可以显著降低TNF-α的mRNA和蛋白表达水平。结论:miR125b-5p通过减少小胶质细胞,TNF-α分泌及促炎因子的释放从而抑制脑缺血后神经炎症,对缺血再灌注损伤具有保护作用