黄芩是一种珍贵的古老中药材。黄芩含有丰富的生物活性成分,据相关药理学研究发现,黄芩具备抑菌抗炎、降血糖、抗肿瘤、增强机体免疫等生理功能,近年来展现出极大的应用前景。天麻,具备良好的镇痛、抗氧化、改善学习记忆,增强非特异性免疫及细胞免疫等多方面药理作用,特别是天麻蛋白的高抑菌活性,近年来备受青睐。本研究采用单因素实验优化黄芩有效抑菌成分的提取温度、提取时间、液料比,其次应用Box-Behnken设计实验方案、响应面分析法研究提取温度、提取时间、液料比的最优值。经优化获得黄芩有效抑菌成分的最佳提取工艺参数:提取温度61℃,提取时间2 h,液料比13:1(mL:g)。此工艺条件下提取的黄芩有效抑菌成分,其期望值(抑菌圈直径)可达13.062 mm,较未优化提取条件下的期望值提高了10.53%。采用单因素实验、Box-Behnken设计实验方案、响应面分析法,优化天麻蛋白提取工艺。经优化获得天麻蛋白的最佳提取工艺条件:提取温度77℃,提取时间4 h,盐浓度为0.8%。最佳工艺参数下提取的天麻蛋白对白色念珠菌有最大的期望值89.08%,与未优化提取条件相比,该期望值提高了16.30%。另外,最佳工艺提取条件下提取的天麻蛋白对白色念珠菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌均具有良好的抑菌活性,抑菌率分别为20.89%、22.02%、22.71%和16.73%。考察天麻蛋白浓缩液对大肠杆菌抑菌活性的稳定性时发现,不同温度下保存的天麻蛋白浓缩液均具有抑菌活性,且对天麻蛋白浓缩液进行安全性评估时发现,天麻蛋白浓缩液安全、对豚鼠皮肤无任何刺激作用。以黄芩提取液、天麻蛋白浓缩液为主要成分,加以石斛皮、紫丁花香等中药提取液,制备天然复方抑菌喷剂,并对喷剂抑菌活性进行考察,结果表明,天然复方喷剂具备良好的抑菌活性。采用皮肤刺激性实验和病理切片实验对喷剂进行安全性评估,结果发现,天然复方喷剂安全,对豚鼠皮肤无刺激性作用。