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目的:观察罗格列酮对卵巢癌细胞株SKOV3细胞的凋亡作用,对其作用机制进行初步的探讨,为今后罗格列酮作为抗肿瘤药物的临床应用提供理论和实验依据。 方法:本实验中所用的细胞株:卵巢癌SKOV3细胞(购自中科院细胞库)。实验共分六组:A组:罗格列酮25μmol/L组;B组:罗格列酮50μmol/L组;C组:罗格列酮100μmol/L组;D组:罗格列酮200μmol/L组;E组:溶媒对照组;F组:空白对照组(RPMI-1640)。1.使用倒置相差显微镜观察药物作用前后卵巢癌SKOV3细胞形态变化。2.药物作用24h、48h后,流式细胞术结合AnnexinV-FITC/PI双染检测卵巢癌SKOV3细胞凋亡情况。3.药物作用48h后,免疫荧光法检测hTERT蛋白表达的变化,RT-PCR法检测hTERT基因表达变化。 结果:1.罗格列酮可以诱导卵巢癌细胞SKOV3发生凋亡,倒置相差显微镜观察到卵巢癌细胞出现凋亡征象,细胞变圆,胞浆固缩,细胞间隙增宽,部分细胞脱壁并漂浮。2.流式细胞仪检测SKOV3细胞凋亡率,结果显示罗格列酮作用24h后随着加药浓度的增高凋亡率明显增加,罗格列酮200μmol/L组凋亡率为21.49±1.10%,且药物作用48h后凋亡更加明显,罗格列酮200μmol/L组凋亡率达到34.61±0.82%。随着药物作用浓度的增加,凋亡率呈明显的浓度依赖性,且48h后凋亡率增加更加显著。3.罗格列酮作用48h后免疫荧光检测结果显示卵巢癌SKOV3细胞中hTERT蛋白表达下调,RT-PCR结果显示hTERT mRNA的表达也下调,同时表现出浓度依赖性。 结论:1.罗格列酮可以诱导体外培养的人卵巢癌SKOV3细胞株凋亡,具有浓度依赖性。2.罗格列酮能明显下调hTERT在蛋白和基因水平的表达。3.罗格列酮诱导人卵巢癌SKOV3细胞株凋亡的机制可能与hTERT、下调有关。