氰戊菊酯（fenvalerate，FEN），是国内最常用的Ⅱ型拟除虫菊酯类杀虫剂之一，具有拟雌激素和抗雄激素样作用，被认为是一种环境内分泌干扰物。目前的研究提示氰戊菊酯有内分泌干扰效应和雄性生殖功能损害作用，但其作用机制还有待深入研究。本课题选择氰戊菊酯这一代表性的环境内分泌干扰物，运用模式动物染毒实验，研究其在不同暴露水平下的雄性生殖毒性作用，再运用蛋白质组学的研究方法，探讨低剂量氰戊菊酯染毒影响雄性生殖系统的作用机制。我们选择8-10w雄性SD大鼠，连续灌胃染毒，每天一次，每周6天，共染毒8周，染毒剂量分别为0、0.00625、0.125、2.5、30mg/kg/d共5组。染毒结束后分别运用计算机辅助精子分析、吖啶橙染色、CTC染色、HE染色方法观察氰戊菊酯对雄性大鼠生殖系统的影响。根据染毒实验的结果，选择对照组与低剂量组的精子、睾丸蛋白进行蛋白质组学研究。计算机辅助精子分析（CASA）对染毒大鼠附睾尾部精子的计数、活动率及前向运动比率进行分析，结果显示染毒各浓度组与对照组无统计学差异；运用吖啶橙染色的方法观察精子DNA损伤各组无统计学差异；运用CTC染色的方法观察精子获能及自发性顶体反应的情况，各组获能率无统计学差异，自发性顶体反应率0.00625mg/kg/d组与对照组相比有所增加，有统计学差异；用HE染色观察精子畸形率显示各组与对照组相比均有明显增加，并有统计学差异，将精子畸形分类计算头部、颈部及尾部畸形率显示各染毒组尾部畸形率与对照组均有统计学差异，2.5、30mg/kg/d组的头部及颈部畸形率与对照组有统计学差异。睾丸HE染色示各组睾丸大体形态上无明显差异。根据染毒实验的结果，采用双向凝胶电泳和质谱技术这两种蛋白质组研究的主要技术手段，选择0mg、0.00625mg两组的精子和睾丸蛋白进行二维电泳，比较染毒后精子、睾丸蛋白的改变，得到差异蛋白质。实验结果显示精子蛋白二维电泳共鉴定出55个差异点，1.5倍以上38个，对应34种蛋白质，有多个与精子结构相关的蛋白，选择其中部分蛋白进行Western Blot验证,趋势一致；睾丸蛋白二维电泳共鉴定出63个差异点，1.5倍以上46个，对应43种蛋白质，选择关键的差异蛋白进行Western Blot验证,并做睾丸免疫组化进行定位研究。对低剂量氰戊菊酯导致精子异常的作用机制进行进一步探讨，我们阅读文献后发现睾丸差异蛋白中有多个和P53表达增加相关，而已有文献显示中等程度超表达P53的转基因雄性小鼠表型为畸形活精子症， Realtime PCR显示染毒组P53mRNA水平表达增加，Western Blot结果提示染毒后P53蛋白水平表达也有增加，其灰度值比较有统计学差异。Realtime PCR检测P53下游基因ccna1mRNA表达水平也有增高。因此我们推测低剂量氰戊菊酯影响雄性大鼠生殖功能的分子机制可能是通过以P53表达增加这一通路作用的。本研究为进一步探讨氰戊菊酯导致男性不育的分子机制提供了一定基础。