单倍体胚胎干细胞,作为新兴的重要的基因编辑技术工具,被人们广泛应用于基因修饰领域以及药物筛选领域,利用单倍体胚胎干细胞自动二倍化的特点,可以使人们更加容易获得某些隐性基因的纯合子,另外,也可以利用基因捕获或增强子捕获等技术寻找新的基因以及增强子。在小鼠上,孤雄单倍体干细胞作为一种新的获得胚胎干细胞的方式,成为了最近的受到大家广泛关注的热点,然而,由于孤雄单倍体胚胎发育率低以及胚胎质量差所导致其建系效率低的问题成为了限制孤雄单倍体胚胎干细胞获得广泛应用的重要因素之一。为改善孤雄单倍体胚胎发育情况,我们检测了孤雄单倍体胚胎的体外发育过程以及Xist基因表达情况。结果发现孤雄单倍体胚胎囊胚发育率只有10~14%,发育至囊胚所需时程从3.3天到3.5天不等。RNA-FISH跟踪Xist表达情况,发现主要存在三种表达模式,Xist阴性胚胎、Xist镶嵌型胚胎和Xist阳性胚胎。Xist在多数早期胚胎中主要呈现表达状态,在发育至囊胚阶段的多数胚胎中主要呈现抑制的趋势,在少数胚胎中一直处于抑制状态。通过si RNA扰低Xist表达,虽然没有改变孤雄单倍体胚胎发育之囊胚的比例,但显著提高其囊胚质量,并提高了接种胚胎后获得Outgrowth的效率。结果说明,Xist的表达可能是导致孤雄单倍体胚胎发育质量差、干细胞建系率低的原因之一。