拮抗酵母对番茄果实灰霉病的抑制作用研究

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番茄灰霉病是导致番茄果实减产、品质下降的重要病害之一。利用拮抗酵母菌替代或降低化学杀菌剂的使用对番茄采后病害防治具有广阔的应用前景。本实验通过离体对峙、显微观察及活体应用等方法,对实验室筛选出的一株高效拮抗酵母菌的生物学特性、抑制灰霉菌机理以及在番茄果实应用中对灰霉病的控制等进行了研究,主要结果如下:1、通过离体和活体实验,筛选出一株能够有效防治番茄采后灰霉菌的拮抗酵母菌KD-16J,通过生理生化实验和26S rDNA D1/D2区序列分析鉴定该株拮抗酵母可能为膜醭毕赤酵母;2、通过测定拮抗酵母菌KD-16J浓度和处理液对灰霉菌的菌丝生长量、菌落扩展、孢子萌发影响观察其抑制效果,发现酵母细胞浓度越大,抑制效果越好,109CFU/mL处理下的灰霉菌落抑制率为85.53%,孢子萌发率高达100%;滤液处理的抑制率比热杀死液高出14.67%,且远低于酵母悬浮液处理;酵母细胞对灰霉菌具有接触吸附作用的同时发现其分泌更多的胞外水解酶来破坏灰霉菌丝细胞壁,结合平板倒扣试验证明拮抗酵母KD-16J菌株抑制灰霉菌生长的机理包括营养与空间竞争、直接寄生作用以及分泌了热稳定、热不稳定及挥发性的抑菌类物质;3、通过采用酵母菌悬液接种和喷施两种处理方式以及不同时间处理进行防治,发现拮抗酵母对番茄果实自然病害的发病率至贮藏结束仅为16.67%,效果显著;且酵母喷施处理时间越早,防治效果越好,与同时处理的93.64%发病率相比,酵母菌早36 h处理的发病率仅为29.12%;通过测定拮抗酵母在番茄果实伤口处的生长动态及防御酶活性,发现KD-16J在番茄果实伤口处繁殖第3天较之初始值增加了 239.5倍,表现出较强的适应性;果实PAL、POD、儿丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶活性均有显著提高,尤其是PAL活性高峰期较之对照组增加了 94.37%,表明拮抗菌可以激发番茄果实的主动防御机制,诱导防御酶活性升高,增强了番茄果实在贮藏期间防御病菌侵染的能力;4、通过对酵母处理后的番茄果实生理品质进行测定,发现拮抗酵母KD-16J处理可显著延缓果实硬度的降低,最大硬度差达到9.3 kg/cm2,有效延缓果实可滴定酸和抗坏血酸的含量的下降速度,推迟了呼吸高峰1.5天,提高总酚含量,有利于果实口感的改善和良好风味的形成;
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